Наиболее распространенными методами окраски цитологических препаратов являются окраска 1%-ным раствором метиленового синего красителя, по методу Нохта, Паппенгейма, а также Романовского - Гимза.
В то же время довольно часто препараты красят по Алексееву, Лейшману и другими способами.
ОКРАСКА ПО МЕТОДУ ПАППЕНГЕЙМА
Окраска по методу Паппенгейма считается наиболее оптимальной в лабораторной практике. Для окраски по этому методу необходимы краска-фиксатор Май-Грюнвальд. основные 1%-ные растворы азура II и эозина.
Для окраски этим методом высушенные на воздухе мазки фиксируют краской-фиксатором Май-Грюнвальда в течение 3-х минут. Через 3 минуты, не сливая краски, на стекло осторожно наливают такой же объем дистиллированной воды. После этого через минуту краску сливают со стекла и, не ополаскивая мазка, наливают на него рабочий раствор азур-эозиновой смеси на 10-30 минут в зависимости от индивидуального подбора времени экспозиции данной партии краски. Только после окончательной окраски препараты споласкивают дистиллированной или водопроводной водой. Экспозицию окраски препаратов выбирают опытным путем для каждой новой партии окраски отдельно.
Для приготовления азур-эозиновой смеси в качестве рабочего раствора на 1 мл дистилирован-ной воды при рН 6,8 берут 1 -4 капли основного раствора эозина и 1 - 4 капли основного раствора азура II. Количество воды берут в зависимости от количества мазков, которые имеются для изучения. На 1 цитологический препарат расходуют 3-4 мл свежеприготовленного красителя.
Азур-эозиновые смеси в готовом виде имеют название краски Романовского - Гимза. Но эта краска при хранении нестойкая и дает осадок. Поэтому в лаборатории основные растворы красок готовят отдельно. Для этого 1 г краски азура II растворяют в 1 л дистилированной воды, которую кипятят непосредственно перед приготовлением краски. Второй раствор готовят из эозина. Для этого 1 г эозина натрия или калия растворяют в 1 литре свежеприготовленной дистилированной воды. Каждую краску хранят в отдельной посуде. Такие растворы неограниченно долго стойки. Перед окраской цитологических препаратов из основных 1%о раствора азура II и эозина готовят рабочие растворы. В отличие от основных растворов, которые хранятся долго, рабочий раствор может быть использован только в день приготовления смеси красок. Рабочий раствор смеси красок готовят в следующем соотношении: 40 мл раствора азура, 30 мл раствора эозина и 70 мл дистилированной воды. Длительность окраски цитологических препаратов составляет 10-30 минут в зависимости от материала и титра красок. В продаже имеются готовые красители, которыми обычно пользуются в лаборатории. Рабочее разведение красок готовят в день окрашивания мазков, используют разведение красителя 1:10 в дистиллированной воде.
ОКРАСКА ПО ЛЕЙШМАНУ
Высушенный на воздухе мазок фиксируют в фиксаторе Лейшмана 3 минуты. Фиксатор сливают, мазок на предметном стекле промывают проточной водопроводной водой, а затем окрашивают мазок краской Романовского - Гимза в течение 10-20 минут. Готовую краску Романовского разводят водой из расчета 15 капель готового основного раствора краски на каждые 10 мл дисти-