лированной воды при рН 6,8. Использование воды другой реакции может привести к плохой, нежелательной, а в ряде случаев и непригодной для цитологического исследования окраске препаратов.
Приготовление фиксатора Лейшмана: 2,5 сухого порошка краски Лейшмана растворяют в 1 л метилового спирта и оставляют на 3 дня в сосуде с притертой пробкой, периодически помешивая. Через 3 дня раствор фильтруют и помещают в другой сосуд. Раствор стоек.
ОКРАСКА ПО АЛЕКСЕЕВУ - МЕТОД СРОЧНОЙ ОКРАСКИ
Первый экспресс-метод срочной окраска по Н. Г. Алексееву.
На высушенные мазки наливают 5-10 капель готового раствора краски Романовского-Гимза, распределив равномерно по стеклу. Через 30 секунд на мазок наливают двойное количество подогретой до 50 - 60°С дистиллированной воды на 3-5 минут. Воду сливают, промывают мазки проточной водой, высушивают, аккуратно промокнув фильтровальной бумагой, и микроскопируют.
Второй метод срочной окраски по Н. Г. Алексееву.
Высушенный на воздухе мазок погружают в фиксатор Лейшмана на 30 секунд. Через 30 секунд фиксатор не сливают, а на препарат наливают горячий, нагретый до 50-60°С раствор краски Романовского-Гимза на 3 минуты. Смывают краску обычной водопроводной проточной водой. Высушивают препарат осторожно, промокая его фильтрованной бумагой. Время окраски 4 минуты.
Для фиксатора берут 4 г сухой краски Лейшмана и растворяют ее в 1 л метанола. Для приготовления краски берут 1,5 капли краски Романовского - Гимза на 1 мл нейтральной дистиллированной воды рН 6,8 - 7,0.
МЕТОД СРОЧНОЙ ОКРАСКИ ПО Т. П. ЯКИМОВОЙ
Свежеприготовленные мазки, слегка подсушенные на воздухе, погружают в 96%-ный спирт и сразу же вынимают, без экспозиции. Мазки, по-
качивая, несколько раз промывают в крупном сосуде с достаточным количеством водопроводной воды и наливают на предметное стекло краску гематоксилин (по Эрлиху) на 1 - 2 - 3 минуты. Через 1-2-3 минуты краску сливают, мазок промывают проточной водой, промокают фильтровальной бумагой и изучают под микроскопом. Время окраски 1-2-3 минуты, зависит от необходимости времени изучения нативного препарата.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ КРАСКИ ГЕМАТОКСИЛИН ПО ЭРЛИХУ
В широкогорлую посуду помещают 2 г гематоксилина, абсолютного спирта - 100 мл; глицерина - 100 мл; дистилированной воды - 100 мл; ледяной уксусной кислоты - 10 мл; смешивают и добавляют растолченные камейные квасцы в избытке (3 г). Посуду закрывают марлей и оставляют на свету до созревания краски - примерно на 14 дней, периодически взбалтывая. Краска после созревания имеет красно-фиолетовый цвет. Хранят краску в темном шкафу, в сосуде с плотной пробкой.
СПОСОБ ОКРАСКИ ПО ЭРЛИХУ
| № п/п |
Ректив |
Время окраски |
| 1 |
Спирт этиловый 70% |
|
| 2 |
Спирт этиловый 50% |
|
| 3 |
Вода дистиллированная |
|
| 4 |
Краска гематоксилин по Эрлиху
|
10 - 20 минут в зависимости от зрелости краски
|
| 5 |
0,5% р-р соляной кислоты в 70% этиловом спирте |
1 секунда до побурения препарата |
| 6 |
Вода дистиллированная |
1 минута до посинения препарата |
| 7 |
Спирт этиловый 50% |
|
| 8 |
Спирт этиловый 70% |
|
| 9 |
Спирт этиловый 80% |
|
| 10 |
Спирт этиловый 96% |
|
| 11 |
Раствор эозина 0,5% спиртовой |
2 минуты |
| 12 |
Спирт этиловый 96% две порции
|
|