Белоусов Е.В. Некоторые аспекты нерепликативной рекомбинации между фрагментами геномной РНК вируса полиомиелита

-Москва, - МГУ, - 2002, – 167 стр. Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук. Специальность: 03. 00. 06 – вирусология. (На правах рукописи). Научные руководители: член-корреспондент РАН и РАМН, доктор биологических наук, профессор В. И. Агол, кандидат биологических наук А. П. Гмыль.

Содержание.
Обзор литературы.
Механизмы генетической рекомбинации РНК-содержащих вирусов.
Реппикативная модель смены матрицы.
Модель разрыв-лигирование.
Возможные механизмы нерепликативной рекомбинации.
Структура 5 '-НТО вируса полиомиелита .
Материалы и методы.
Ферменты и реактивы.
Плазмиды
Бактериальные штаммы.
Синтетические олигонуклеотиды.
Базовые методы молекулярного клонирования.
Направляемый олигонуклеотидами мутагенез.
Получение полноразмерных мутантных клонов полиовирусной кДНК
Создание рабочих конструкций.
Получение полноразмерных транскриптов.
Трансфекция монослоя культуры клеток.
Анализ вирусных клонов.
Модификация 3 '-концевого нуклеотида РНК 5 '-фрагмента.
Результаты.
Конструирование 5'-и 3 '-фрагментов геномной РНК вируса полиомиелита.
Неинфекционные фрагменты геномной РНК могут рекомбинировать с образованием инфекционного потомства.
Влияние структуры 3'-концевого нуклеотида 5'-фрагмента на эффективность рекомбинации и распределение мест перекреста .
Изучение возможного участия криптическш рибозимов типа hammerhead в
рекомбинации между фрагментами РНК.
Обсуждение результатов.
Рекомбинация между фрагментами геномной РНК вируса полиомиелита идет по нерепликативному механизму.
Механизм нерепликативнойрекомбинации между фрагментами РНК.
Образование рекомбинантов, содержащих полную последовательность 5'-фрагмента.
Участие криптических рибозимов типа hammerhead в нерепликативной рекомбинации между фрагментами РНК вируса полиомиелита.

Стоимость данного файла составляет 5 баллов