Гвоздева О.В. Ингибирование экспрессии индуцибельных субъединиц иммунопротеасомы под действием малых интерферирующих РНК

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук: 03.01.03 - Молекулярная биология. — Институт химической биологии и фундаментальной медицины
Сибирского отделения Российской академии наук. — Новосибирск, 2016. — 22 с. Научный руководитель: д.б.н., профессор Черноловская Е.Л. Целью данного исследования является создание нового типа комбинированных индукторов РНК интерференции, способных эффективно подавлять экспрессию нескольких каталитических субъединиц иммунопротеасомы и гена множественной лекарственной устойчивости MDR1. В ходе исследования решались следующие задачи:
Разработать на основе siPHK ингибиторы экспрессии индуцибельных субъединиц иммунопротеасомы LMP2, LMP7 и MECL1 и исследовать влияние химических модификаций и модификаций структуры дуплекса на их интерферирующую активность, длительность ингибирующего действия и способность проникать в клетки.
Получить ингибиторы экспрессии индуцибельных субъединиц иммунопротеасомы LMP2, LMP7 и MECL1 на основе shPHK, экспрессирующихся рекомбинантным лентивирусом и сравнить эффективность и длительность подавления экспрессии генов-мишеней с аналогичными ингибиторами на основе siPHK.
Сконструировать на основе селективно-модифицированных siPHK, ингибиторы экспрессии гена MDR1, с различной длиной дуплекса (42 и 63 п.н.) и исследовать механизм их интерферирующего действия и возможность внутриклеточного процессинга Дайсером.
Сконструировать комбинированные мультимерные селективно-модифицированные интерферирующие РНК, направленные на подавление экспрессии трех разных генов и определить эффективность и механизм их действия. Научная новизна. В данной работе впервые разработан новый тип комбинированных индукторов РНК интерференции, способный эффективно подавлять экспрессию трех генов-мишеней (tsiCombi). Созданный tsiCombi не вызывает неспецифического иммунного ответа и эффективно процессируется на короткие полностью функциональные мономеры, способные длительно подавлять экспрессию нескольких генов