М.: РУДН, 2003. – 139 с.
Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических
наук. Специальность: 03.00.07 – микробиология. 03.00.15 – генетика.
(На правах рукописи). Научные руководители: кандидат биологических
наук, старший научный сотрудник Осипова И. Г., кандидат
биологических наук, доцент Васильева Е. А.
Аннотация.
Цель изучить корректирующее действие ПБ при экспериментальном дисбактериозе. Содержание.
Обзор литературы.
Нормофлора и ее роль в обеспечении колоницационной резистентности организма.
Адгезия как первый этап колонизационного процесса.
Нарушения колонизационной резистентности - дисбиозы. Модели
Дисбактеризов.
Инфекции, вызываемые энтерогеморрагическими Escherichia coli.
Урогенитальные инфекции, как следствие дисбиоза.
Профилактика и лечение дисбиозов.
Использование пробиотиков в терапии дисбиозов.
Низкоинтенсивное импульсное лазерное излучение (НИЛИ) в терапии инфекционных заболеваний.
Собственные результаты.
Материалы и методы
Материалы.
Методы.
Идентификация бактерий.
Методы исследования бактериальной адгезии.
Тест агрегации дрожжей.
Тест «исследование адгезии к иммобилизированным субстратам» (Growth assay).
Обогащение культур микроорганизмов клетками, экспрессирующими пили I типа.
Радионуклеидное исследование адгезии.
Формалинизация эритроцитов.
Исследование адгезии к эритроцитам.
Исследование адгезии микроорганизмов к клеткам защечного эпителия.
Исследование связывание протеина FimH с пероксидазой хрена.
Обработка ферментами ASG и РРО.
Обработка НИЛИ.
Определение антагонистической активности методом отсроченного антагонизма.
Моделирование дисбактериоза у животных.
Исследование транслокации кишечной флоры в органы и ткани.
Методы работы с ДНК.
Выделение плазмидной ДНК.
Обработка ДНК.
Методы введения генетического материала в клетку.
Кальциевая трансформация.
Конъюгация и мобилизация.
Оценка продукции колицина и чувствительности бактерий к его действию
Тест с верхним агаром.
Методы статистической обработки результатов исследований.
Антагонистическая активность нормальной микрофлоры по отношению к
патогенным Escherichia coli.
Сравнительное исследование адгезивной активности различных групп пробиотиков.
Исследование влияния на уровень адгезии различных штаммов E.coli физико-химических факторов.
Влияние низкочастотного инфракрасного лазерного излучение на уровень адгезии патогенных E.coli к различным субстратам.
Исследование влияния НИЛИ на уровень жизнеспособности E.coli.
Влияние НИЛИ на уровень адгезии патогенных E.coli к эритроцитам.
Изменение адгезии патогенных E.coli под влиянием обработки НИЛИ эритроцитов.
Влияние НИЛИ на уровень адгезии патогенных E.coli к клеткам защечного эпителия.
Влияние обработки ферментами L-Аспарагиназой и Полифенол оксидазой на уровень адгезии E.coli к различным субстратам.
Определение бактерицидных свойств ферментов ASG и РРО.
Определение эффективной антиадгезивной концентрации ASG и РРО.
Исследование влияния ферментов L-Аспарагиназы и Полифенол оксидазы на адгезию патогенных E.coli к эритроцитам.
Исследование влияния ферментов ASG и РРО на адгезию патогенных E.coli к клеткам защечного эпителия.
Исследование влияния ферментов ASG и РРО на адгезию E.coli в опытах "Исследования адгезии к иммобилизированным субстратам" и "радионуклеидном исследовании адгезии".
Исследование влияния ASG и РРО на величину связывания очищенного протеина FimH с пероксидазой хрена в реакции ELISA.
Влияние комплексной обработки НИЛИ и ферментами ASG и РРО на уровень адгезии E.coli.
Влияние НИЛИ и ферментов РРО и ASG на адгезивную активность пробиотиков.
Глава
6. Исследование защитного действия пробиотиков на модели in vivo Отработка модели дисбактериоза на мышах.
Моделирование инфекционного процесса, вызванного E.coli 0157: Н7.
Использование пробиотиков для профилактики и лечения инфекции, вызванной E.coli 0157: Н7.
Цель изучить корректирующее действие ПБ при экспериментальном дисбактериозе. Содержание.
Обзор литературы.
Нормофлора и ее роль в обеспечении колоницационной резистентности организма.
Адгезия как первый этап колонизационного процесса.
Нарушения колонизационной резистентности - дисбиозы. Модели
Дисбактеризов.
Инфекции, вызываемые энтерогеморрагическими Escherichia coli.
Урогенитальные инфекции, как следствие дисбиоза.
Профилактика и лечение дисбиозов.
Использование пробиотиков в терапии дисбиозов.
Низкоинтенсивное импульсное лазерное излучение (НИЛИ) в терапии инфекционных заболеваний.
Собственные результаты.
Материалы и методы
Материалы.
Методы.
Идентификация бактерий.
Методы исследования бактериальной адгезии.
Тест агрегации дрожжей.
Тест «исследование адгезии к иммобилизированным субстратам» (Growth assay).
Обогащение культур микроорганизмов клетками, экспрессирующими пили I типа.
Радионуклеидное исследование адгезии.
Формалинизация эритроцитов.
Исследование адгезии к эритроцитам.
Исследование адгезии микроорганизмов к клеткам защечного эпителия.
Исследование связывание протеина FimH с пероксидазой хрена.
Обработка ферментами ASG и РРО.
Обработка НИЛИ.
Определение антагонистической активности методом отсроченного антагонизма.
Моделирование дисбактериоза у животных.
Исследование транслокации кишечной флоры в органы и ткани.
Методы работы с ДНК.
Выделение плазмидной ДНК.
Обработка ДНК.
Методы введения генетического материала в клетку.
Кальциевая трансформация.
Конъюгация и мобилизация.
Оценка продукции колицина и чувствительности бактерий к его действию
Тест с верхним агаром.
Методы статистической обработки результатов исследований.
Антагонистическая активность нормальной микрофлоры по отношению к
патогенным Escherichia coli.
Сравнительное исследование адгезивной активности различных групп пробиотиков.
Исследование влияния на уровень адгезии различных штаммов E.coli физико-химических факторов.
Влияние низкочастотного инфракрасного лазерного излучение на уровень адгезии патогенных E.coli к различным субстратам.
Исследование влияния НИЛИ на уровень жизнеспособности E.coli.
Влияние НИЛИ на уровень адгезии патогенных E.coli к эритроцитам.
Изменение адгезии патогенных E.coli под влиянием обработки НИЛИ эритроцитов.
Влияние НИЛИ на уровень адгезии патогенных E.coli к клеткам защечного эпителия.
Влияние обработки ферментами L-Аспарагиназой и Полифенол оксидазой на уровень адгезии E.coli к различным субстратам.
Определение бактерицидных свойств ферментов ASG и РРО.
Определение эффективной антиадгезивной концентрации ASG и РРО.
Исследование влияния ферментов L-Аспарагиназы и Полифенол оксидазы на адгезию патогенных E.coli к эритроцитам.
Исследование влияния ферментов ASG и РРО на адгезию патогенных E.coli к клеткам защечного эпителия.
Исследование влияния ферментов ASG и РРО на адгезию E.coli в опытах "Исследования адгезии к иммобилизированным субстратам" и "радионуклеидном исследовании адгезии".
Исследование влияния ASG и РРО на величину связывания очищенного протеина FimH с пероксидазой хрена в реакции ELISA.
Влияние комплексной обработки НИЛИ и ферментами ASG и РРО на уровень адгезии E.coli.
Влияние НИЛИ и ферментов РРО и ASG на адгезивную активность пробиотиков.
Глава
6. Исследование защитного действия пробиотиков на модели in vivo Отработка модели дисбактериоза на мышах.
Моделирование инфекционного процесса, вызванного E.coli 0157: Н7.
Использование пробиотиков для профилактики и лечения инфекции, вызванной E.coli 0157: Н7.