Меджидова М.Г. Выявление маркеров цитомегаловируса у новорожденных и детей раннего возраста. Развитие апоптоза при цитомегаловирусной инфекции in vitro

- Москва, - ГУ НИИ вирусологии, - 2005, – 159 стр. Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук. Специальность:
03.00.03. - Молекулярная биология. (На правах рукописи). Научный руководитель: кандидат биологических наук Н. Е. Федорова.

Аннотация.
Цель настоящего исследования заключалась в сравнительной оценке эффективности методов лабораторной диагностики ЦМВИ у недоношенных новорожденных и детей раннего возраста с подозрением на ЦМВИ, а также в изучении действия ЦМВ на гибель клеток в зависимости от пролиферативного состояния клеток.

Содержание.
Цитомегаловирус человека: структура и репликация.
Структура и организация генома.
Репликация цитомегаловируса.
Методы лабораторной диагностики цитомегаловирусной инфекции.
Культуральные методы.
Непосредственное определение вирусных антигенов в клинических образцах.
Определение нуклеиновых кислот вируса.
Серологические методы.
Действие цитомегаловируса на программированную клеточную гибель.
Ингибирование апоптоза в ЦМВ инфицированных клетках.
Влияние вирусных белков на программированную клеточную гибель.
Анализ клеточных факторов, участвующих в апоптозе.
Материалы и методы.
Основные реактивы и препараты, используемые в работе.
Культура клеток и вирус.
Определение инфекционной активности вируса.
Синхронизация ФЛЭЧ.
Иммуноцитохимический метод.
Определение целостности цитоплазматической мембраны фибробластов.
Выявление активированной каспазы-3 и фрагментированной ДНК.
Пациенты.
Исследуемый материал.
Быстрый культуральный метод (БКМ).
Твердофазный иммуноферментный анализ (тИФА).
Иммуноблот.
Авидность антител.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР).
Выявление маркеров ЦМВ у новорожденных и детей раннего возраста.
Повышение чувствительности выявления инфеционно активного вируса с помощью БКМ.
Частота обнаружения маркеров ЦМВ у недоношенных и маловесных новорожденных детей с использование количественных вариантов БКМ, ПЦР и методов серодиагностики.
Выявление маркеров ЦМВ у детей раннего возраста.
Сравнение эффективности выявления ЦМВ в клинических образцах методом ПЦР и БКМ.
Сравнительный анализ коммерческих тест-систем, выявляющих анти-ЦМВ антитела IgG и IgM.
Влияние ЦМВИ на гибель диплоидных фибробластов человека.
Динамика гибели фибробластов человека, инфицированных в различных фазах клеточного цикла.
Экспрессия мРНК генов Bcl-2, Fas и белка Bcl-2 в клетках, инфицированных ЦМВ в различных пролиферативных состояниях.
Активация каспазы-3 и транслокация цитохрома С в цитоплазму зараженных клеток.
Влияние ЦМВ на целостность цитоскелета клетки.

Стоимость данного файла составляет 5 баллов