Эйхгорн Г. (ред.) Неорганическая биохимия. Том 1

Подождите немного. Документ загружается.

Ионофоры — хелатарующие агенты для щелочных металлов

263»

82] идентична структуре нигерицина, за тем исключением, что он

е содержит гидроксильной группы в концевом кольце напротив

ольца, содержащего карбоксил. Атомы кислорода, образующие

вязь с солью серебра, такие же, как у нигерицина; однако из-за

тсутствия гидроксильной группы образуются не две, а одна во-

ородная связь по типу «голова к хвосту» [83]. О катионной се-

ективности этого ионофора еще не сообщалось. Расстояния

.g—О составляют 2,4—2,7 (ион-дипольные) и 2,2 А (с карбокси-

атным кислородом).

Большее число атомов водорода, химически похожих, но не

дентичных, делает спектры ПМP карбоксилсодержащих ионофо-

ов более сложными для интерпретации, чем спектры нейтраль-

ых ионофоров. Однако поле лигандов, образуемое цвиттер-ион-

ой структурой карбоксильных ионофоров, можно исследовать

ругим вариантом метода ЯМР. Вследствие того что ядро

бладает ядерным спином

, оно «чувствует» асимметрию окру-

жающего его поля, реагируя на нее уширением ЯМР-линий. Та-

им образом, большая асимметрия, наблюдаемая для комплексов

Ja+ с нигерицином по сравнению с моненсином, согласуется с бо-

ее близким подходом отрицательно заряженного карбоксильного

тома кислорода к катиону [47], как это следовало из кристалли-

еской структуры его серебряной соли [79, 80].

Наиболее существенное отличие ионофора Х-537А (обозначе-

ия по Гоффману — JIa Рошу) [84] от других карбоксилатных

онофоров состоит в том, что в нем имеется ароматическое коль-

,о, к которому присоединена концевая карбоксильная группа,

(роме того, кольцо содержит фенольный гидроксил, благодаря

ему оно легко поддается химическим превращениям. Второй его

никальной особенностью является наличие кетояной карбониль-

:ой группы в области прямолинейного участка цепи антибиотика,

"ак как, по-видимому, эта группа участвует в образовании ион-

щпольных связей, комплексообразующие свойства молекулы та-

х>вы, что она очень чувствительна к реагентам, образующим эд-

икты с кетонами.

Х-537А — до сих пор единственный карбоксильный ионофор,

[збирательный по отношению к Cs+ [10, 18]. Его относительно

шзкая степень селективности, примерно следующая липотропно-

iy ряду, по-видимому, свидетельствует о большей гибкости его

)бразующего комплекс кольца по сравнению с антибиотиками с

юлее выраженной селективностью.

Структура Х-537А была установлена рентгеноструктурным

шализом его бариевой соли [85]. Комплекс с двухвалентным ка-

'ионом состоит из электронейтрального цвиттер-иона, содержаще-

о два аниона ионофора. Один «без штриха» (unprimed) анион

соординируется к катиону атомами кислорода с образованием пя-

"и ион-дипольных связей (Ba—О 2,7—3,1 А) и шестой связи с за-

264

i лава 2

ряженной карбоксильной группой (Ba—О 2,8 А) (рис. 6.1, Ж)

Другой, «со штрихом» (primed) анион хотя и имеет почти такуи

же конформацию, как молекула ионофора «без штриха», коорди

нируетея только через карбокоилатный анион (Ba—О 2,6 А)

концевой гидроксил (Ba—О 2,8 А) (рис. 6.1, 3). Молекула ион о

фора «со штрихом», кроме того, связана водородной связью с од

ной молекулой воды, ,которая >в свою очередь связана с барие:

(Ba—О 2,7 А), так что координационное число катиона равно £

Мы можем также показать, что Х-537А в растворе образуе

комплексы с Sr

+, Ca

+, Mg

+, а также Ba

+ и ионами щелочны

металлов. Изотермы связывания с Ba

+ согласуются с таким сс

-ставом комплекса: (ионофор)

Ва

+ [71]. Х-537А действует ка

ионофор для двухвалентных ионов; мы подтвердили его способ

ность переносить

133

+ и

+ в объемную фазу, состоящую и

толуола и бутанола [71].

Имеются сведения и о структуре других моненсинов (монспси

нов В и С), но и этих данных недостаточно, чтобы охарактеризс

вать их селективность при комплексообразовавии. Есть предва

рительные данные, что дианмиция (селективный к Na+) такж

имеет сходство с этим рядом [80], как, по-видимому, и Х-206 [84

Таблица 6.

Молекулярные свойства ионофоров

Расстояния кислород—катион, А

Селективность

комплексообразования

Ионофор

Соль

ион-дипольные с карбоксилом

Селективность

комплексообразования

Нонактин

KSCN 2,7—2,9

[26]

—

>K>Rb>Cs;

> Na > Li [44]

Эшшатия В

2,6—2,8

[401

—

К > Rb > Cs >

>Na>Li[51]

Валиномицин

KAuCl

2,7—2,8

[52]

—

K>Rb>Cs>

>Na>Li [18]

Дибензо-18-ко-

рона-6

Криптанд

Моненсин

RbSCN

Ag+

2,7—2,8

2,9

2,4—2,7

[62]

[64]

[79]

3,8

Ag>K>Na>NHT

> Cs > Li [59]

Na > К > Rb >

> Li > Cs [18]

Нигерииин

Ag+ 2,4—2,7

[80] 2,2 K>Rb>Na>

>Cs>Li [18]

Х-537А

2,7

[85]

2,8

Cs > Rb =

= K>Na>Li [18]

Гризориксин

Ag+

2,4—2,7

[83]

2,2

Ионофоры — хелатарующие агенты для щелочных металлов

265»

селективный к K

). Диавмицин напоминает Х-537А тем, что его

лектр разделения щелочных ионов относительно широкий [10,

8]. Поэтому, может быть, важно то, что дианмицин также екло-

1ен образовывать комплексы с двухвалентными катионами [71].

Расстояния кислород—катион, определяющие наличие связи в

сомплексах с этим ионофором, найденные рентгеноструктурным

летодом, приведены в табл. 6.3.

5. ДИНАМИКА КОМПЛЕКСООБРАЗОВАНИЯ

С ИОНОФОРАМИ

Хотя на основании простого подбора соответствующих молеку-

тярных моделей и можно сделать некоторые предположения о

тричинах ионной селективности данного ионофора, равновесие

комплексообразования зависит также и от других факторов. Энер-

гии сольватации свободных ионов щелочных металлов сильно от-

личаются между собой. Когда комплексообразование происходит

з присутствии полярного растворителя, процесс десольватации

^ответственно сам по себе будет сильно зависеть от природы ка-

тиона. Свободная энергия комплексообразования, следовательно,

эпределяется различием между процессами десольватации иона и

ассоциации иона с ионофором. Таким образом, наблюдаемая се-

лективность данного ионофора может меняться с изменением рас-

творителя. Ион-дипольное взаимодействие между ионофором и

ионом имеет много общего с сольватацией иона; в процессе ком-

плексообразования ионофор действительно сольватирует ион. Из-

менение энергии в процессе комплексообразования в свою очередь

можно разделить на два слагаемых: энтальпия, возникающая при

взаимодействии между ионом и ионофором, и энтропия, опреде-

ляемая изменением информации ионофора от той, которая наи-

более предпочтительна в свободном состоянии, до той, которая

требуется в комплексе для наиболее выгодного расположения

соответствующих атомов кислорода возле катиона*.

Следующая последовательность стадий выведена для динамиче-

ского, катализируемого ионофором транспорта ионов через био-

логические мембраны и другие липидные барьеры. Мембрану

можно рассматривать как тонкий липидный слой, помещенный в

водную среду, причем несвязанный катион первоначально концен-

трируется в водной фазе, а гидрофобный ионофор — в липидной

фазе. Силы взаимного отталкивания внутри электроотрицательной

кислородной системы должны вынуждать несвязанный в комплекс

ионофор принять конформацию, отличную от его информации в

* Общее изменение энтропии при образовании комплекса включает также

изменение энтропии при десольватации исходного сольватированного иона.—

Прим. ред.

266

i лава 2

комплексе. Таким образом, свободный ионофор, по-видимому

«чувствует» присутствие катиона еще до начала перегруппиррвк]

в конформацию комплекса. Это означает, что -в «интерфазе» об

разуется слабый промежуточный комплекс ионофор—катион. За

тем ионофор может изменять свою конформацию так, чтобы еп

кислородная система вытеснила сольватную воду катиона. Про

цесс заканчивается образованием стабильного липофильного и он о

форного комплекса, который диффундирует через мембрану, поел-

O-M

CH-M

/Ул .

липофильныи

/барьер

/М+,1*

[*• M

* M

Рис. 6.4. Последовательность стадий, происходящих в процессе транспорта, ин

дуцируемого нейтральным нонофором.

Начиная сверху, ионофор I диффундирует через липидный барьер внутренней поверхности

где он встречается с гидратированньА1 катионом, М+*НгО. B интерфазе образуется слабы(

комплекс М+-Н

0-1. Затем I претерпевает конформационное превращение в I*. после чего Oi

вытесняет сольватную оболочку M+, образуя липидорастворимый комплекс M+-I*. которы(

легко диффундирует через мембрану. B другой интерфазе комплекс атакуется растворителем

при этом катион вновь гидратируется, а освободившийся I диффундирует назад в противо

положную интерфазу и начинает новый транспортный каталитический цикл.

чего комплекс атакуется водой и происходит его диссоциация. Те

перь ионофор снова свободен и может диффундировать в обрат

ном направлении к другой стороне мембраны, чтобы участвовав

в новом каталитическом цикле транспорта катиона. Эта последо

вательность реакций иллюстрируется рис. 6.4.

6. ТРАНСПОРТНЫЕ РАВНОВЕСИЯ,

КАТАЛИЗИРУЕМЫЕ ИОНОФОРАМИ*

Нейтральные ионофоры переносят ионы через липидные барье

ры в форме заряженных частиц, затем незаряженный свободны?

ионофор .возвращается, чтобы закончить каталитический цикл. Та

ким образом, такие ионофоры способны к общей транслокацш-

зарядов и выражение для равновесия, катализируемого этим,к

* Неточное выражение, так как равновесия не могут быть каталитическими

катализируются отдельные этапы равновесия. — Прим. ред.

Ионофоры — хелатарующие агенты для щелочных металлов

267»

шнофорами, содержит электрическую составляющую; равновесие

хостигается, когда электрохимическая активность транспортируе-

мого иона по обе стороны 'мембраны становится одинаковой. Pan-

ювесие описывается уравнением Нернста для диффузионного по-

тенциала:

^ = T

59 MB]g

(1)

тхе [M+]i и [М+]

— концентрации катионных частиц M+ на сто-

эоне 1 и 2 соответственно.

Когда больше чем одна из присутствующих катионных частиц

может образовать комплекс с ионофором, применимо уравнение

Гольдмана

.. [M+lt+Pmn [N

]i + P

[0¾...

ДE = 59 MB Ig

[М+Ь + Pmn [N+b +

mo [0+ь

_ _

(2)

Множители P

и P

представляют относительные проникающие

способности ионных частиц M+ и N+ и M+ и 0+ соответственно.

Эти факторы являются функцией концентрации ионофорного ком-

плекса [IM+] в интерфазе, которая при отсутствии большой насы-

щающей концентрации катиона связана с равновесием выраже-

нием

{!] [МН-]

AD -

[Ш+]

(3)

Следовательно, билонный потенциал, возникающий вдоль мем-

браны или липидного барьера между растворами двух связываю-

щих ионы частиц, выражает относительное сродство этих проти-

вопоставляемых ионных частиц к ионофору и подвижности ком-

плексов при прохождении через мембрану. Второе назначение тех

же коэффициентов проницаемости — выражать относительные про-

водимости мембран для одинаковых концентраций различных

ионов. Корреляции ,мембранных проводимостей и равновесий ком-

плексообразования для ряда щелочных ионов даны на рис. 6.2;

там же приведены соответствующие значения селективности, по-

лученные по митохондриальному критерию.

Для того чтобы облегчить миграцию катиона из водной среды

в липофильную фазу, содержащую ионофор, нужно дать возмол<-

ность лнпидосовместимо'му аниону мигрировать вместе с катио-

ном. Это -мешает созданию достаточного мелчфазового потенциала

[ср. уравнение (1)] для уравновешивания электрохимического по-

тенциала катиона в обеих фазах до того, как сможет осуществить-

ся измеримая миграция катиона. При фиксированной концентра-

ции таких анионов, как SCN

, и при более высоких !концентраци-

ях катиона миграция катиона в идеальном случае достигает

изотермы насыщения Ленгмюра, начиная с которой можно опре-

268

i лава 2

делять сродство ионофора к определенному катиону:

1 ' , Kp 1

[М1+]

орг

- [М+]

Шорг

[IJopr

где [All+]

орг

— концентрация катиона в органической фазе (прг

отсутствии контроля за концентрацией ионофора), [М

]

но

—

концентрация M+, добавленного к воде, и [I]

ор

г—концентрации

ионофора, добавленного в органическую фазу. Кажущаяся кон-

станта диссоциации KD является функцией концентрации

л и.п

идо-

совместимого аниона, при этом она заметно не изменяется при из-

менении рН (ср. ниже карбоксильные ионофоры).

Карбоксильные ионофоры могут входить в липидные фазы ли-

бо как электронейтральные цвиттер-ионные комплексы, либо каь

незаряженная недиссоциированная карбоновая кислота. При нейт-

ральных значениях рН только небольшое количество ионофора

проходит липидный барьер в виде заряженных частиц; следова-

тельно, этот класс ионофоров фактически не проявляет себя элек-

трически по отношению к мембранам. При более высоких значе-

ниях рН несвязанная в комплекс карбоксилатная фор.ма этих

ионофоров, по-видимому, становится достаточно преобладающей

чтобы проводить ток и вызывать электрометрически детектируе-

мые эффекты на мембранах. Хотя в выражении для транс-мем-

бранного равновесия нет никакой электрической составляющей

появляется преобладающий протонный градиент:

[М+]

[N+]

[0+Ь

[Н+]

- [M+h - [N+h - [O

Идентичные градиенты в конечном счете достигаются для каж-

дого иона, способного к прохождению сквозь мембраны с ионо-

фором, независимо от его сродства к ионофору.

Однако в экспериментах по экстракции катнопные частицы

конкурируют с протонами за ионофор:

I.H +M+ I".M+ +H

(6;

Таким образом, при фиксированном значении рН можно полу-

чить идеальную изотерму насыщения Ленгмюра как функцию кон-

центрации катиона и его сродства. Так как общего переноса за-

ряда не происходит, не возникает никакого межфазного потен-

циала к на это равновесие не влияют присутствующие анионные

частицы. По мере того как рН влияет на кажущееся сродство

к катиону карбоксильного ионофора, на кажущуюся константу

диссоциации карбоксильной группы (р/С

) влияют катионные час-

тицы и концентрации. Равновесия, описывающие взаимодействие

между карбоксильными ионофорами и двухвалентными катиона-

ми, иногда более сложные.

Ионофоры — хелатарующие агенты для щелочных металлов

269»

7. ПРИМЕНЕНИЕ ИОНОФОРОВ

Несмотря на то что большинство ионофоров при выделении'

рассматривали как антибиотики, их терапевтическое применение

вводится лишь к случаям, когда необходимо нарушить процессы-

такопления энергии митохондриями высших организмов [8, 9¾,-

\нтибиотическая активность ионофоров, по-видимому, также обус-

ювлена тем, что они нарушают метаболизм энергии и ионный

метаболизм в микроорганизмах [86—88]. Хотя грамицидин систе-

матически токсичен, он находит ограниченное медицинское при-

менение как антибиотик местного назначения. Токсичность ионо-

форов по отношению к морской креветке Artemia salina использо-

за.лась как процедура отбора («скрининг») для их обнаружения

[89].

Некоторые карбоксильные антибиотики имеют ограниченную

:пособность проникать в кишечник птиц, а моненсин, как сообща-

лось, эффективен против кокков и кишечных паразитов птиц [90].

Валпномицин и актины были применены для получения ион-селек-

гивных электродов [см. уравнения (1) и (2)] [91—93]. Срок экс-

плуатации таких электродов ограничен, но благодаря экстремаль-

но высокой K

: ^+-селективности валиномицинового электрода

он может найти широкое применение для контроля за концентра-

цией K

в присутствии высоких концентраций Na+, например в

крови или моче. Возможно с его помощью можно осуществлять

контроль за содержанием К+ в сыворотке во время лечения сер-

дечных кризов или диабетической комы.

Ионофоры широко применялись как средство, позволяющее

экспериментально нарушать биоэнергетику и ионный метаболизм

субклеточных органелл, например митохондрий, как изолирован-

ных [1, 7—11, 13, 16, 18, 21, 24, 34, 35, 46], так и in situ (асцитная

опухоль) [94—96], а также хлоропластов [97—100] и хромато-

форов [100—105]. Их также использовали для селективного уве-

личения проницаемости других биологических мембранных систем,

например эритроцитов [106—108] и цист [109].

Одним из наиболее поразительных свойств ионофоров являет-

ся их способность индуцировать постоянную селективную проводи-

мость в искусственных двойных липидных слоях, которая копиру-

ет проводимость природных мембран. Электрометрически эта по-

стоянная селективность параллельна селективности биологических

мембран. Липидные мембраны, обработанные некоторыми ионо-

форами, например аламетицином, используются для изучения мо-

лекулярной природы электровозбуждения, которое характерно

для мембран нервов и мышц [69, 70].

Так как все описанные свойства ионофоров обусловлены их

способностью действовать в качестве мобильных переносчиков

ионов, основное внимание было сосредоточено на изучении их как

270

i лава 2

модели системы связанных с мембраной носителей. В действитель

ности, их специфичность к субстрату и числа оборотов (например

валиномицин — 200 с

-1

, нигерицин — 500 с

-1

в мембране мито

хондрий) достаточны для истинных ферментов, хотя способност

валиномицина сублимироваться без разложения необычна дл:

биологических катализаторов. Маленький размер ионофороо об

легчает изучение молекулярной структуры и конформационны:

превращений, ответственных за их свойства, разнообразным)

сложными физическими методами. Такие же структурные особси

ности (а именно катион, находящийся в полярной внутренне!

части циклической молекулы с липофильной наружной оболочкой

имеют мембранопроницаемые железосвязывающие агенты биоло

гического происхождения (гл. 5). Поэтому проблема мембрапиоп

транспорта в природе имеет к ним прямое отношение.

Следует ожидать, что природные связанные с мембранами но

сители должны обладать дополнительными свойствами, HOMHMI

тех, которыми обладают ионофоры. Они должны быть прикрепле

ны внутри данной мембраны так, чтобы они находились в равно

весии со всеми целлюлярными !мембранными системами. Это мо

жет сопровождаться тем, что ионофороподобная структура при

крепляется к большой объемистой молекуле белка. Дл:

построения активной транспортной системы необходимо участи!

природного носителя, способного реагировать с источником энер

гии, таким, как АТФ. Можно думать, что для того, чтобы оказан

аллостерический эффект на конформацию активной ионофорно!

части носителя, который в свою очередь обратимо изменяет ерод

ство транспортируемого субстрата, необходимы связывание и по

следующий гидролиз АТФ. Таким образом, нужно перевести носи

тель в конформацию с высоким сродством для того, чтобы связан

субстрат в области низкой электрохимической активности. По ме

ре того как носитель переносит субстрат в область высокой хими

ческой активности субстрата, сродство должно быть понижет

аллостерически, посредством связывания или гидролиза АТФ, чте

приводит к освобождению субстрата. Такая система циклическое

изменения сродства части субстрата за счет внутренней энергш

системы напоминает схему транспорта, предложенную Внлбранд

том и Розенбергом [ПО].

Ионофоры стали применять и как средство для измененш

функции мембран, и как модель для понимания поведения мем

бран. Мы можем надеяться, что в будущем из мембран будут вы

делены природные эквиваленты ионофоров, что значительно по

могло бы нашему проникновению в глубины их более просты)

прототипов.

Ионофоры — хелатарующие агенты для щелочных металлов

271»

ДОПОЛНЕНИЯ, ВНЕСЕННЫЕ В КОРРЕКТУРУ

Недавно методом рентгеноструктурного анализа были установ-

тены структура и конформация еще двух карбоксильных ионо-

форов— Х-206 [111] и дианмицина [112].

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Pressman В. С., Harris Е. J., Jagger W. S., Hohnson 1. H., Proc. Natn. Acad.

Sci., U. S., 58, 1949 (1967).

2. Brockmann H., Schmidt-Kastner G., Chem. Ber., 88, 57 (1955).

3. Brockmann H., Springorum M., Traxler G., Hdfer /., Naturwiss., 50, 689

(1963).

4. Shemyakin М. M., Aldatiova N. A., Vinogradova Е. /., Feigina М. Yu., Tetra-

hedron Lett., 1963, 1921.

5. Shemyakin М. M., Vinogradova Е. /., Feigina М. Yu., Aldanova N. A., Logi-

nova N. F., Ryabova N. F., Pavelenko I. D., Experientia, 21, 548 (1955).

6. Шемякин М. M., Виноградова Е. И., Фейгина М. Ю., Алданова Н. А., Шве-

цов Л. В., Фонина Л. А., ЖОХ, 36, 1391 (1966).

7. MeMurray W., Begg R. W., Arch. Biochem. Biophys., 84, 546 (1959).

8. Moore С., Pressman В. С., Biochem. Biophys. Res. Commun., 15, 562 (1964).

9. Pressman В. С., Proc. Natn. Acad. Sci. U. S., 53, 1076 (1965).

!0. Pressman В. С., in «Mitochondria, Structure and Function», 5th Meeting, Fed.

Europ. Biochem. Soc., Academic Press, New York, 1969, p. 315.

11. Pressman B. C., in E. Racker (ed.), Membranes of Mitochondria and Cho-

lorplasts, Reinhold Van Nostrand, New York, 1970, p. 213.

12. Simon W., Pioda L. A. R., Wipf H. K, in T. Bucher, H. Sies (eds.), Inhibitors,

Tools in Cell Research, Springer-Verlag, New York, 1969, p. 356.

13. Pressman B. C., Antimicrobial Agents and Chemotherapy-1969, 1970, 28.

14. Mueller P.. Rudin D. 0., Biochem. Biophys. Res. Commun., 26, 398 (1967).

15. Лев А. А., Вучинекий E. П., Цитология, 9, 102 (1967).

16. Lardy H. A., Graven S. N., Estrada-O. S., Federation Proc., 26, 1355 (1967).

17. Eisenman G., Federation Proc., 27, 1249 (1968).

18. Pressman B. C., Federation Proc., 27, 1283 (1968).

19. Wipf H. K., Paehe W., Jordan P., Zahner H., Keller W., Sehierlein

Simon W.,

Biochem. Biophys. Res. Commun., 36, 387 (1969).

20. Harned R. L., Hidy P. H., Corum C. J., Jones K. L., Antibiot. Chemother., 1,

594 (1951).

21. Lardy H. A., Johnson D., McMurray W. C., Arch. Biochem. Biochys., 18, 587

(1958).

22. Graven S. N., Estrada-O S., Lardy H. A., Proc. Natn. Acad. Sci. U. S., 53,

1076 (1965).

23. Graven S. N., Estrada-O S., Lardy H. A., Proc. Natn. Acad. Sci. U. S., 56,

654 (1965).

24. Chappell J. B., Crofts A. R., Biochem. J., 95, 393 (1965).

25. Kilbourn В. T., Dunitz J. D., Pioda L. A. R., Simon W., J. Mol. Biol., 30, 559

(1967).

26. Dobler M., Dunitz J. D., Kilbourn В. T., Helv. Chim. Acta, 52, 2573 (1969).

27. Shemyakin M. M., Angew. Chem., 72, 342 (1960).

28. Beck /., Gerlach H.. Prelog V., Voser W., Helv. Chim. Acta, 45, 621 (1962).

29. Serger R., Witkop B., J. Am. Chem. Soc., 87, 2011 (1965).

30. Pederson C. J., J. Am. Chem. Soc., 89, 7017 (1967).

31. Keller-Schierlein W., in T. Biicher, H. Sies (eds.), Inhibitors, Tools in Cell

Research, Springer-Verlag, New York, 1969, p. 365.

32. Prestegard J. H., Chan S. /., Biochemistrv, 8, 3921 (1969).

33. Prestegard J. H., Chan S. I., J. Am. Chem. Soc., 92, 4440 (1970).

'272

Г лава 6

34. Graven S. N., Lardy Н. A., Johnson D., Rutter A., Biochemistry, 5 (1966).

35. Graven S. N., Lardy H. A., Rutter A., Biochemistry, 5, 1735 (1966).

36. Pioda L. A. R., Waehter H. A., Dohner R. E., Simon W., Helv. chim. Acta, 5C

1373 (1967).

37. Piattner P. A., Vogter K, Studer R. 0., Quitt P., Keller-Schierlein W., Heh

Chim. Acta, 46, 927 (1963).

38. Quitt P., Studer R. 0., Vogler K, Helv. Chim. Acta, 46, 1715 (1963).

39. Hamill R. L., Higgens C. E., Boaz H. E., Gorman M., Tetrahedron Lett., 1969

4255.

40. Dobler M., Dunitz J. D., Krajewski J., J. Biol. Biol, 42, 603 (1969).

41. Shemyakin M. M., Ovehinnikov Yu. A., Ivanov V. T., Antonov V. K- et at.

Biochem. Biophys. Res. Commun., 29, 834 (1967).

42. Shemyakin AL M., Ovchinnikov Yu. A., Ivanov V. T., Antonov V. K. et at.

J. Memb. Biol., 1, 402 (1969).

43. Pressman B. C., Harris E. S., Abstracts of Seventh International Congress о

Biochemistry, Tokyo, August 1967, Vol. V, p. 900.

44. Pioda L. A. R., Dissertation, Eidenossischen Technische Hochschule, Zurich

1969.

45. Shemyakin M. M., Ovehinnikov Yu. A., Ivanov V. T., Evstratov A. V., Nature

213, 412 (1967).

46. Pressman B. C., Haynes D. H., in D. C. Tosteson (ed.), The Molecular Bnsi:

of Membrane Function, Prentice-Hall Inc., Englewood Cliffs, N. J., 1969

p. 221.

47. Haijnes D. H., Kowalsky A., Pressman B. C., J. Biol. Chem., 244, 502 (1969)

48. Ivanov V. T., Laine I. A., Abdullaev N. D., Senyavina L. B. et al., Biochem

Biophys. Res. Commun., 1969, 34.

49. Ohnishi M., Urry D. W., Biochem. Biophys. Res. Commun., 36, 164 (1969).

50. Urry D. W., Ohnishi M., in D. W. Urry (ed.), Spectroscopic Approaches U

Biomolecular Conformation, American Medical Association, Chicago, III, 1970

p. 263.

51. Haynes D. H., Dissertation Thesis, University of Pennsylvania, 1970.

52. Pinkerton M., Steinrauf L. K-, Dawkins P., Biochem. Biophys. Res. Commun.

35, 512 (1969).

53. Dubos R., Hotehkiss R., J. Exp. Med., 73, 629 (1941).

54. Stern A., Gibbons W., Craig L. C., Proc. Natn. Acad. Sci. U. S., 61, 734

(1968).

55. Hotchkiss R., Adv. Enzymol., 4, 153 (1944).

56. Goodall M. C., Biochim. Biophys. Acta, 203, 28 (1970).

57. Pederson C. J., Federation Proc., 27, 1305 (1968).

58. Pederson C. J., J. Am. Chem. Soc., 92, 389, 391 (1970).

59. Frensdorff H. K, J. Am. Chem. Soc., 93, 600 (1971).

60. Izaat R. M., Rytting J. H., Nelson D. P., Haymore B. L., Christensen J. J.,

Science, 164, 443 (1969).

61. Bright D.. Truter M. R., Nature, 225, 176 (1970).

62. Bright D., Truter M. R., J. Chem. Soc. (B), 1970, 1544.

63. Dietrich B., Lehn J. M., Sauvage J. P., Tetrahedron Lett., 34, 2889 (1969).

64. Metz B., Moras D., Weiss R., Chem. Commun., 1970, 217.

65. Wieland T., Luben G., Ottenheyn H., Faesel J. et al, Angew. Chem., 80, 209

(1968).

66. Wieland T., Faulstich H., Burgermeister W., Otting W. et al, FEBS Letters,

9, 89 (1970).

67. Meyer C. E.. Reusser F., Experientia, 23, 85 (1967).

68. Payne J. W., Jakes R.. Hartley B. S., Biochem. J., 117, 757 (1970).

69. Mueller P., Rudin D. O., Nature, 217, 713 (1968).

70. Mueller P., Rudin D. O., J. Theor. Biol., 18, 222 (1968).

71. Pressman B. C.. unpublished observations.

72. Akasakim K., Karasawa K., Watanabe M., Yonehara H., Umezawa H., J. An-

tibiot. Ser. A, 16, 127 (1963).