Лабораторные работы и задачи по биохимии, практическое пособие

Подождите немного. Документ загружается.

кровеносных сосудов , так как медь необходима для синтеза коллагена и

эластина.

Марганец активирует многие ферментативные системы, он необходим

для биосинтеза антител, для эритропоэза и образования гемоглобина.

Стимулирует синтез холестерина и жирных кислот, проявляя липотропное

действие.

Цинк в качестве простетической группы входит в состав молекул ряда

ферментов , он обнаружен в инсулине. Обладает липотропным действием ,

нормализует жировой обмен, предотвращает жировую инфильтрацию

печени. Наибольшее количество цинка содержится в печени, поджелудочной

железе, половых железах .

Хлор . До 65% всего хлора находится во внеклеточной жидкости ,

главным анионом которой является Сl

. До 17% связано соединительной

тканью и хрящами; 12,4% находится внутри клеток . Обмен хлора тесно

связан с обменом натрия, но в канальцах почек они могут выделяться и

реабсорбироваться независимо друг от друга.

Фосфаты . В цельной крови большая часть фосфора находится в

эритроцитах в виде органического фосфата, в плазме крови присутствуют

липидный фосфор , следы эфиров фосфорной кислоты и неорганический

фосфат. 50% общего фосфора находится в костях , до 20% - во внеклеточной

жидкости . Фосфаты играют важную роль в обменных процессах : входят в

состав коферментов , нуклеиновых кислот, фосфопротеинов , фосфолипидов .

Из них образуются: 2,3-бисфосфоглицерат, играющий важную роль в

регуляции транспорта кислорода, фосфаты — обязательный компонент

клеточных мембран, составная часть АТФ, креатинфосфата, выполняющих

важную роль в переносе и сохранении энергии. Вместе с кальцием фосфаты

образуют апатиты — основу костной ткани. Регуляция обмена фосфора

аналогична обмену кальция с тем различием , что паратгормон, повышающий

содержание кальция в плазме крови, снижает содержание фосфатов , повышая

их экскрецию почками.

Кальций. В организме содержится 1-1,5 кг кальция. Внеклеточный ион.

Содержание в плазме - 2,29 - 2,99 ммоль / л, в эритроцитах - следы . 90%

находится в костях , 1% - во внеклеточной жидкости . Меньше половины

кальция в плазме крови находится в ионизированном виде и является

физиологически активным, большая часть — связана с белками или

представлена солями: фосфатом , цитратом , сульфатом кальция. Наибольшей

кальцийсвязывающей способностью обладают альбумины и β- глобулины .

Ионы кальция, участвуя во многих процессах жизнедеятельности ,

работают на уровне клетки и на уровне внеклеточных систем . Его

биологическая роль :

- необходим для секреторной активности практически всех эндо- и

экзокринных железистых клеток ;

- участвует в свертывании крови;

- является вторичным посредником при мембранной передаче

сигнала , активируя 40 ферментов ;

- выполняет опорную функцию, являясь основным компонентом

костного скелета;

- обеспечивает целостность мембран (влияет на проницаемость), так

как способствует плотной упаковке белков , стабилизируя клеточные

мембраны ;

- участвует в нервно-мышечном возбуждении и сокращении.

Кальций принимает участие в создании потенциала покоя (70 - 90 мВ),

уменьшая скорость проникновения положительно заряженных ионов в

клетку;

- стимулирует выработку гастрина, обусловливая выработку

пищеварительных соков ;

- вместе с инсулином облегчает поступление глюкозы в клетки.

Многообразные функции ионов кальция на поверхности и внутри клетки

обусловлены его способностью соединяться с немембранными комплексами

— АТФ, фосфатами, белками. Основные биологические процессы :

размножение, пролиферация, гибель клетки, — осуществляются при участии

кальция.

Содержание ионов кальция в плазме крови определяют следующие

факторы .

1. Состояние костной ткани — все факторы , ускоряющие рассасывание

костей , увеличивают содержание кальция и фосфатов в крови за счет

деминерализации скелета (резорбции, мобилизации из кости ). Все факторы ,

способствующие образованию костной ткани, уменьшают его за счет

минерализации.

2. Витамин D

и его аналоги способствуют всасыванию кальция и

фосфатов в кишечнике и препятствуют их выведению с мочой .

3. Паратгормон стимулирует мобилизацию кальция и фосфатов из

костей , на уровне почек усиливает реабсорбцию кальция и уменьшает

реабсорбцию фосфатов , повышает содержание ионов кальция в плазме.

4. Кальцитонин способствует минерализации костей , увеличивает

экскрецию фосфатов с мочой , снижает содержание ионов кальция в плазме.

5. Ацидоз приводит к рассасыванию костей (содержание кальция

возрастает), а алкалоз — к их минерализации (уменьшается концентрация

ионов кальция в плазме). Регуляцию обменов фосфора и кальция

осуществляют паращитовидные, щитовидные железы через секретируемые

ими гормоны : кальцитонин, паратгормон, а также витамин D

и кальцитриол.

Паратгормон. Гормон-полипептид , состоящий из 84 аминокислотных

остатков . Секретируется клетками паращитовидной железы в ответ на

уменьшение концентрации ионов кальция в крови. Основными клетками-

мишенями для паратгормона являются клетки костей , почек , тонкой кишки

(действует опосредованно через усиление биосинтеза кальцитриола ).

Паратгормон действует на клетки-мишени через ц- АМФ и протеинкиназы .

Паратгормон стимулирует резорбцию костной ткани с освобождением

кальция за счет активации ферментов остеокластов , разрушающих

промежуточное вещество кости . В почках , в клетках дистальных канальцев ,

паратгормон стимулирует реабсорбцию ионов кальция из первичной мочи ,

но ингибирует реабсорбцию фосфатов , и они выводятся из организма. Таким

образом паратгормон увеличивает концентрацию кальция (это активирует

секрецию кальцитонина) и уменьшает уровень фосфатов в крови.

Кальцитриол. Химическая природа - производное

циклопентанпергидро-фенантрена. Клетками-мишенями являются клетки

почек , костей , кишечника. Вырабатывается при уменьшении концентрации

кальция в крови и усилении секреции паратгормона. Его предшественником

является витамин D

, который гидроксилируется в печени (фермент 25-

гидроксилаза), затем в почках (l-гидроксилаза). С места синтеза (в почках ) он

транспортируется кровью в кишечник , где в клетках слизистой стимулирует

синтез кальций-связывающего белка, который располагается на поверхности

клеток слизистых и, благодаря своей высокой способности связывать

кальций, облегчает его всасывание. Из клетки кальций попадает в кровоток

п oсредством Са

/Na

-АТФ-азы .

На костную ткань кальцитриол действует аналогично паратгомону :

активируя ферментную систему остеокластов , вызывает деминерализацию

кости и увеличивает концентрацию кальция и фосфатов в крови. В клетках

почек он усиливает реабсорбцию кальция и фосфатов . Результатом действия

кальцитриола является: увеличение концентрации кальция и фосфатов в

крови, ингибирование секреции паратгормона.

Кальцитонин - антагонист паратгормона и кальпептид , состоящий из 32

остатков аминокислот. Вырабатывается С-клетками щитовидной и

паращитовидной желез . Синтезируется сразу в активной форме. Количество

кальцитонина в кровотоке регулируется концентрацией ионов кальция в

кроyвеличениe стимулирует выброс кальцитонина в кровь, а уменьшение -

подавляет. Кроме кальция, секрецию кальцитонина стимулируют адреналин,

глюкагон, гастрин. Органами, содержащими клетки-мишени, являются кости ,

почки, печень. Механизм действия кальцитонина мембранно-

внутриклеточный: активирует фосфодиэстеразу, уменьшает содержание ц-

АМФ.

Действуя на костную ткань, кальцитонин ингибирует ферменты

остеокластов , что способствует снижению концентрации кальция в крови. В

клетках почечных канальцев кальцитонин вызывает повышенное выведение

кальция и фосфатов с мочой . Таким образом кальцитонин вызывает

уменьшение концентрации кальция и фосфатов в крови. Совместное

действие паратгормона, витамина D, кальцитонина и кальцитриола

поддерживает содержание кальция и фосфора в крови на постоянном уровне.

Определение кальция в сыворотке крови

Принцип метода. Кальций образует с глиоксаль - бис-(2-оксианилом ) в

щелочной среде комплекс красного цвета. Интенсивность окраски

измеряется фотометрически при длине волны 520-550 нм .

Реактивы . 1. Стандартный раствор CaCO

2,5 ммоль / л. 2. Раствор

NaOH 0,4 моль / л. 3. Раствор глиоксаль - бис-(2-оксианила ) 2,4 ммоль / л в

метаноле .

Ход работы . Смешать в пробирках реактивы и сыворотку крови

согласно таблице 10.

Примечание: лабораторная посуда должна служить исключительно для

определения кальция и быть абсолютно чистой .

Таблица 10.

Ход определения кальция

Реактивы Опытная

проба, мл

Калибровочная

проба, мл

Контрольная

проба, мл

Вода дистиллированная

1,00 1,00 1,00

Сыворотка крови 0,02 - -

Раствор 1

(стандартный раствор)

- 0,02 -

Раствор 2 (NaOH) 0,50 0,50 0,50

Перемешивают и инкубируют 10 минут

Раствор 3

(раствор глиоксаль - бис-

2-оксианила )

2,00 2,00 2,00

Пробы тщательно перемешать и инкубировать в течение 5 минут. Не

позже чем через 10 минут после окончания инкубации измерить величину

оптической плотности опытной и калибровочной проб против контрольной

пробы при длине волны 520-550 нм .

Расчет. Расчет концентрации кальция в анализируемых пробах

провести по формуле :

5,2

станд

опыт

⋅=

где С - концентрация кальция, ммоль / л;

опыт

– оптическая плотность опытной пробы ;

станд

– оптическая плотность калибровочной пробы ;

2,5 – концентрация кальция в стандартном растворе, ммоль / л

Диагностическое значение теста. Кальций – основной компонент

костной ткани. Около 40% кальция сыворотки крови связано с белками,

свыше 50% находится в ионизированном (физиологически активном

состоянии). В норме в сыворотке содержится 2,25 - 2,75 ммоль / л кальция.

Гиперкальциемия наблюдается при гипервитаминозе Д , повышенной

функции паращитовидных желез , острой атрофии костной ткани, миеломной

болезни, некоторых эндокринных патологиях , сердечной недостаточности . У

больных бронхопневмонией увеличение концентрации кальция в крови

соответствует тяжести заболевания. Физиологическая гиперкальциемия

может наблюдаться при определенной диете и у новорожденных детей .

Гипокальциемия наблюдается при недостаточности витамина Д ,

сниженной функции паращитовидных желез , при хронических заболеваниях

почек , гипонатриемии, остром панкреатите, циррозе печени, алкоголизме,

старческом остеопорозе.

Определение концентрации хлоридов в сыворотке и плазме крови

титриметрическим методом

Принцип метода. Исследуемая биологическая жидкость титруется

раствором азотнокислой ртути в присутствии индикатора дифенилкарбазона.

Когда все хлорид -ионы связаны , избыток ионов хлора образует с

индикатором комплекс сине- лилового цвета, что служит признаком конца

титрования.

Реактивы . 1. Раствор нитрата ртути . 2. 1 Н раствор азотной кислоты . 3.

Раствор дифенилкарбазона в 96% этиловом спирте.

Ход работы . В маленький стаканчик налить 1,8 мл дистиллированной

воды , внести 0,2 мл исследуемой биологической жидкости , добавить 0,1 мл

раствора дифенилкарбазона и 1 каплю азотной кислоты и титровать рабочим

раствором при постоянном перемешивании до появления окраски.

Расчет.

[Хлориды ], ммоль / л = К х а, где

К=93,3 (коэффициент пересчета, полученный при титровании

калибровочных растворов с известной концентрацией хлоридов );

а - количество миллилитров раствора нитрата ртути , ушедшее на

титрование исследуемой биологической жидкости .

Нормальные величины . 95-100 ммоль / л хлоридов в сыворотке и плазме

крови.

Диагностическое значение теста. Повышенное содержание хлоридов в

крови может наблюдаться при обезвоживании организма, острой почечной

недостаточности , несахарном диабете, некоторых эндокринных

заболеваниях .

Понижение показателя может быть при потере солей вследствие

избыточного потоотделения, рвоты и т. д .; увеличении объема внеклеточной

жидкости при водной нагрузке; и некоторых других состояниях .

Работа 14. Азотистый обмен . Определение концентрации мочевины

в сыворотке крови

Обмен аммиака в организме. В результате обмена белков в организме

во всех тканях постоянно образуется аммиак . Источники аммиака в

организме: реакции окисления и дезаминирования аминокислот; распад

пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов ; распад биогенных аминов .

Аммиак является токсичным веществом для организма, особенно для

центральной нервной системы. Основной путь обезвреживания аммиака в

организме – биосинтез мочевины в печени (орнитиновый цикл).

Цикл мочевины . В печень аммиак доставляется из тканей в виде

глутамина; из мышц и кишечника – в составе аланина. Глутамин

расщепляется глутаминазой на аммиак и глутаминовую кислоту . Биосинтез

мочевины осуществляется в 5 этапов : первый и второй проходят в

митохондриях печени, третий, четвертый и пятый – в цитозоле печени.

Ферменты биосинтеза мочевины : карбамоилфосфатсинтетаза 1;

орнитинкарбамоилтрансфераза; аргининосукцинат- синтетаза;

аргининосукцинатлиаза; аргиназа.

Биологическое значение орнитинового цикла : 1) обезвреживание

аммиака; 2) регуляция азотистого баланса в организме – при поступлении в

организм большого количества белка скорость цикла возрастает; 3) поставка

фумарата в цикл трикарбоновых кислот, оксалоацетата для биосинтеза

глюкозы и аминокислот.

Источники азота, углерода и кислорода в мочевине. Первая

аминогруппа – из аммиака, образовавшегося при окислительном

дезаминировании глутамата. Вторая аминогруппа поставляется аспартатом ,

образовавшемся при трансаминировании оксалоацетата с аминокислотами.

Углерод – из СО

, образовавшегося в митохондриях при дыхании. Кислород

– из молекулы воды .

Диагностическое значение определения аммиака. В норме в крови

содержится менее 65 мкмоль / л аммиака. Гипераммониемия – повышение

концентрации аммиака в крови – наблюдается при 1) врожденной

недостаточности хотя бы одного их пяти ферментов биосинтеза мочевины ; 2)

печеночной недостаточности ; 3) избыточном потреблении белков ; 4)

кишечных кровотечениях .

С мочой в сутки выделяется 0,5 г аммиака. Количество аммиака в моче

повышается при респираторном и метаболическом ацидозе, гиперфункции

коры надпочечников , лихорадочных состояниях , бактериальном разложении

мочи и некоторых других заболеваниях .

Остаточный азот крови – это азот небелковых компонентов сыворотки

крови. Главным образом это азот мочевины – 85%, креатинина, мочевой

кислоты , индикана, аминокислот, солей аммония – 15%. Так как преобладает

азот мочевины , при изучении азотистого обмена определяют количество

мочевины в крови.

Определение мочевины

Принцип метода: мочевина образует с диацетилмонооксимом в сильно

кислой среде в присутствии тиосемикарбазида и ионов трехвалентного

железа красный комплекс.

Реактивы . 1. Стандартный раствор мочевины 16,65 ммоль / л. 2. Раствор,

содержащий диацетилмонооксим 5 ммоль / л, тиосемикарбазид 0,9 ммоль / л,

соль железа трехвалентного 25 мкмоль / л, серную кислоту 0,9 моль / л.

Ход работы . В трех тонкостенных пробирках смешивают реактивы

согласно таблице 11.

Таблица 11.

Ход определения мочевины с тиосемикарбазидом

Реактивы (мл) Проба Стандарт Контроль

Сыворотка,

разведенная моча

Реактив 1

Дист. вода

Раствор 2

0,01

2,00

0,01

2,00

0,01

2,00

Отверстие пробирок закрывают алюминиевой фольгой и пробирку

помещают точно на 10 мин. на кипящую водяную баню. Потом содержимое

пробирок быстро охлаждают проточной водой и измеряют оптическую

плотность пробы (А

) и стандарта (А

) против контрольного раствора.

Измерение следует провести до 15 минут после охлаждения. Мочу перед

анализом разводят дистиллированной водой от 1÷50 до 1÷100 (результат

умножают на разведение).

Расчет:

Мочевина (ммоль / л)=16,65·А

/ А

Определение мочевины в сыворотке крови уреазным методом по

реакции с фенол-гипохлоритом

Принцип метода. Мочевина под действием фермента уреазы

разлагается на углекислый газ и аммиак . Аммиак определяют

колориметрически по образованию продуктов синего цвета (индофенолов ) с

гипохлоритом натрия и фенолом . Реакция катализируется нитропруссидом

натрия. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию мочевины .

Реактивы . 1. Раствор уреазы в ЭДТА-буфере. 2. Цветной реактив –

фенол 0,11 моль / л, нитропруссид натрия 0,18 моль / л. 3. 0,011 моль / л раствор

гипохлорита натрия в 0,13 моль / л растворе NaOH. 4. Стандартный раствор

мочевины 0,5 ммоль / л. 5. Изотонический 154 ммоль / л раствор NaCl.

Ход определения. В пробирку вносят 0,1 мл рабочего раствора уреазы

и добавляют 0,02 мл сыворотки крови, разведенной изотоническим

раствором NaCl в соотношении 1:9. Закрывают пробирку пробкой ,

перемешивают, инкубируют 15 мин. при 37°С. Затем добавляют 0,3 мл

цветного реактива и 0,3 мл рабочего раствора гипохлорита Na. Пробы

перемешивают, инкубируют при 37°С и фотометрируют при длине волны

500-560 нм (зеленый светофильтр ) в кювете с длиной оптического пути 1 см

против контрольной пробы . Контрольную и стандартную пробы

обрабатывают аналогично опытной , но вместо исследуемой сыворотки крови

вносят соответственно 0,02 мл изотонического раствора NaCl (контрольная

проба) или 0,02 мл стандартного раствора мочевины .

Расчет проводят по формуле :

105,0

⋅⋅=

ст

оп

мочевины

C ,

где С

мочевины

– концентрация мочевины в пробе, ммоль / л; Е

оп .

– экстинкция

опытной пробы ; Е

ст.

– экстинкция стандартной пробы ; 0,5 – концентрация

мочевины в стандартном растворе, ммоль / л; 10 – коэффициент разведения.

Нормальные величины – 2,50 – 8,33 ммоль / л. У лиц старше 60 лет

уровень мочевины может слегка превышать норму.

Диагностическое значение теста. Мочевина синтезируется в печени

при обезвреживании аммиака, который интенсивно образуется в реакциях

окисления и дезаминирования аминокислот, пуриновых и пиримидиновых

нуклеотидов , и выводится с мочой . Таким образом , содержание мочевины в

крови зависит от соотношения процессов мочевинообразования в печени и ее

выведения почками. При ухудшении функции почек именно повышение

мочевины в крови является наиболее ранним диагностическим тестом . Из

фракций остаточного азота в наибольшей степени в крови повышается

мочевина, которая может составлять до 90% фракции остаточного азота при

патологии (в норме – 50%).

Различают три группы причин, приводящих к увеличению содержания

мочевины в крови: надпочечную азотемию, почечную и подпочечную.

Надпочечная азотемия обусловлена повышением уровня мочевины в крови,

наступающим вследствие сниженного поступления крови к почкам

( циркулярная недостаточность в клубочках , шок , кровопотеря,

дегидратация). Азотемия почечного происхождения бывает связана с острой

или хронической почечной недостаточностью вследствие гломерулонефрита,

пиелонефрита, артериосклероза, некроза кортикального слоя почек .

Подпочечная азотемия бывает связана с облитерацией мочевыводящих путей

( мочекаменная болезнь, опухоли мочевыводящих путей , предстательной

железы и т. д.).

При почечной гипертонии уровень мочевины в крови повышен, а при

эссенциальной гипертонии содержание мочевины бывает в пределах нормы.

Повышение уровня мочевины в крови может быть и при усиленном

распаде белков (синдром сдавливания, ожоги, лихорадка, перитонит), при

обезвоживании организма.

Снижение уровня мочевины бывает связано с отрицательным балансом

азота в результате плохого питания, с печеночной недостаточностью или с

гипергидратацией организма. Снижение концентрации мочевины в

сыворотке крови наблюдается также при беременности , вирусном гепатите,

острой дистрофии печени , отравлении фосфором , мышьяком и др. ядами.

Работа 15. Определение концентрации креатинина в сыворотке

крови и в моче . Расчет клиренса креатинина.

Креатинин – продукт неферментативного гидролиза креатинфосфата –

вещества, которое в мышцах служит источником высокоэнергетических

фосфатных групп для АТФ.

Определение креатинина в сыворотке крови

Принцип метода: в щелочной среде пикриновая кислота

взаимодействует с креатинином с образованием оранжево-красной окраски,

которую измеряют фотометрически при длине волны 500-510 нм (метод

Яффера). Определение проводят после депротеинирования (удаления

белков ). Определение не совсем специфично – интерферируют вещества с

активной метиленовой группой и некоторые восстанавливающие вещества,

например , глюкоза.

Реактивы . 1. Стандартный раствор креатинина 177 мкмоль / л в растворе

альбумина 12 г/л. 2. Депротеинирующий раствор – кислота трихлоруксусная

1,22 моль / л (ТХУ ). 3. Пикриновая кислота 0,04 моль / л. 4. Натрий гидроксид

0,75 моль / л.

Ход работы . В трех центрифужных пробирках смешивают реактивы

согласно таблице 12.

Таблица 12.

Ход определения креатинина в сыворотке крови

Реагенты , мл Проба Контроль Стандарт

Сыворотка крови 0,5 - -

О 1,0 1,5 1,0

Стандартный раствор

креатинина

- - 0,5

ТХУ 0,5 0,5 0,5

Перемешивают и центрифугируют 5 мин. при 3000 g. Затем из каждой

пробирки отбирают 0,5 мл надосадочной жидкости и переносят в другие

пробирки. В каждую пробирку добавляют по 0,5 мл пикриновой кислоты и

по 0,5 мл NaOH. Перемешивают и через 20 мин. измеряют оптическую

плотность пробы (А

) и стандартного раствора (А

) против контрольного

раствора при длине волны 500-510 нм .

Расчет: [креатинин] = 177 А

/А

Норма: мужчины 61-715 мкмоль / л

женщины 53-97 мкмоль / л.

Определение креатинина в моче

При определении концентрации креатинина в моче предварительно

разбавляют мочу в 100 раз , результат умножают на 50. Смешивают реактивы

согласно таблице 13. Перемешивают и через 20 мин. измеряют оптическую

плотность пробы (Е

оп.

) и стандартного раствора (Е

ст.

) против контроля при

длине волны 500-510 нм .

Таблица 13.

Ход определения креатинина в моче

Реагенты , мл Проба Контроль Стандарт

Моча 0,50 - -

О 0,25 0,75 0,50

Стандартный раствор

креатинина

- - 0,25

ТХУ 0,25 0,25 0,25

Пикриновая кислота 0,50 0,50 0,50

NaOH 0,50 0,50 0,50

Расчет суточной экскреции креатинина производят по формуле :

vЕ

VСE

ст

стоп

⋅

, где

К – содержание креатинина в суточной моче, мкмоль / л; Е

оп .

–

экстинкция опытной пробы , Е

ст.

– экстинкция стандартной пробы ; С

ст.

–

содержание креатинина в стандартной пробе, 177 мкмоль / л; V – суточное

количество мочи , мл; v – количество мочи , взятое для анализа, мл.

За сутки с мочой выводится 4,4 – 17,7 ммоль или 0,5-2,0 г креатинина.

Примечание. При сборе суточной мочи в качестве консерванта

рекомендуется использовать тимол. Пробы хранить до 7 дней при 2-8ºС.

Диагностическое значение теста. Повышение уровня креатинина в

сыворотке крови является информативным показателем почечной

недостаточности или мышечной дистрофии. Устойчивое повышение уровня

креатинина в крови указывает на нарушение работы почечного фильтра при

далеко зашедших патологических процессах , однако для ранней диагностики

заболеваний почек тест на повышенное содержание креатинина в крови не

дает положительного результата. Повышение уровня креатинина в крови

отмечается также при обструкции мочевыводящих путей , кишечной

непроходимости , тяжелом диабете, некрозе мышц, синдроме длительного

сдавливания, ожогах .

Расчет клиренса креатинина

На основе определения креатинина в моче и в плазме (сыворотке)

крови рассчитывается клиренс креатинина, который является

характеристикой клубочковой фильтрации. Клиренс креатинина

(коэффициент очищения) показывает, какой объем плазмы крови полностью

очищается от данного вещества за 1 мин., и рассчитывается по формуле :

С =

73,1

VКИ ⋅⋅ ,

где КИ – концентрационный индекс; V – минутный диурез ; 1,73 –

стандартная поверхность тела ; S – истинная поверхность тела

Концентрационный индекс показывает, во сколько раз

концентрируется данное вещество почками.

КИ =

V = Д /t,

где Д – объем мочи за время t, мл; t – время в мин.

S – 0,0167

кг,вессм,рост ⋅

[креатинин] в моче

[ креатинин] в крови