Волова Т.Г. Введение в биотехнологию. Методические указания по лабораторным работам

МОДУЛЬ 1. ВВЕДЕНИЕ В ПРЕДМЕТ «БИОТЕХНОЛОГИЯ

Работа 1.3. Фазы роста микробиологических культур и расчет кинетических параметров



Введение в биотехнологию. Метод. указания по лабораторным работам

-11-

акций. Однако этот путь является практически мало применяемым вследст-

вие того, что исследованных к настоящему времени внутриклеточных реак-

ций много и нет возможности построить математическую модель с большим

количеством сложных реакций. Другой путь решения поставленной задачи

построения модели, сводится к анализу лишь некоторого числа переменных,

характеризующих развитие популяции, или конечного числа обобщенных

ферментативных реакций ответственных за эти переменные. В этой связи,

разработка математической модели кинетики сводится к объединению групп

процессов, протекающих в клетках, анализу влияния факторов среды на про-

текание процессов и идентификации параметров модели.

В качестве низшего уровня при разработке кинетической модели обычно

рассматривают исследования, связанные с анализом внутриклеточных процес-

сов. При этом достаточная глубина разработки кинетической модели может

быть реализована при рассмотрении кинетики роста микробных популяций с

учетом обобщенных ферментативных реакций, возрастной неоднородности

клеточной популяции и физиолого-биохимической структуры популяции. На

более высоком иерархическом уровне рассматриваются кинетические модели

утилизации субстрата, роста клеток и образования продукта (рис. 1.1

).

Модель популяции микроорганизмов

Кинетика

утилизации

субстрата

Кинетика

роста

клеток

Кинетика

образования

продуктов

метаболизма

Кинетика обобщенных

ферментативных реакций

Кинетика с учетом

возрастной неоднородности

Рис. 1.1. Иерархическая схема разработки кинетической модели

популяции микроорганизмов

В данной работе рассматривается кинетика утилизации субстрата при

гетеротрофном культивировании бактерий. При культивировании водород-

ных бактерий Ralstonia eutropha обычно используется сбалансированный пи-

тательный состав, за основу которого принята солевая среда Шлегеля:

Na

2

HPO

4

·H

2

O – 9,1; KH

2

PO

4

– 1,5; MgSO

4

·H

2

O – 0,2; Fe

3

C

6

H

5

O

7

·7H

2

O – 0,025

(г/л). Микроэлементы вводятся по прописи Хоагланда из расчёта 3 мл стан-

дартного раствора на 1 л среды. Стандартный раствор содержит: H

3

BO

3

–

0,288; CoCl

2

·6H

2

O – 0,030; CuSO

4

·5H

2

O – 0,08; MnCl

2

·4H

2

O – 0,008;

ZnSO

4

·7H

2

O – 0,176; NaMoO

4

·2H

2

O – 0,050; NiCl

2

– 0,008 (г/л). В качестве

субстратов могут быть приняты хлористый аммоний и фруктоза.

Из ферментативного катализа известны две принципиально различные

простейшие кинетические схемы, приводящие к дискриминируемым зависи-

мостям скорости процесса от концентраций двух субстратов. С учетом авто-

МОДУЛЬ 1. ВВЕДЕНИЕ В ПРЕДМЕТ «БИОТЕХНОЛОГИЯ

Работа 1.3. Фазы роста микробиологических культур и расчет кинетических параметров



Введение в биотехнологию. Метод. указания по лабораторным работам

-12-

каталитического процесса микробного роста эти две схемы могут быть пред-

ставлены в следующем виде:

S

1

+N

↔

S

1

N

2

S

↔

S

1

S

2

N

→

2N+P ; (1)

S

1

+N

↔

S

1

N

→

X+P

S

2

+X

↔

S

2

X

→

2N+P, (2)

где S

1

и S

2

– концентрации субстратов; N – «ненасыщенная» форма клетки;

X – «насыщенная» форма клетки, способная к делению; P – продукт.

Механизм (1

) включает две обратимые равновесные стадии присоеди-

нения субстратов (механизм тройного комплекса). Механизм (2

) включает

стадии присоединения субстратов, которые, по крайней мере, разделены од-

ной необратимой стадией (пинг-понг-механизм).

Для механизма группы (2

) характерна следующая зависимость от кон-

центрации субстратов:

2

1

S

K

S

K

m

++

µ

=µ

, (3)

где K

1

и K

2

– эффективные константы сродства микроорганизма к субстратам

S

1

и S

2

.

Для механизмов группы (1

) уравнение удельной скорости роста может

быть записано в виде

21

2

1

SS

KK

S

K

m

++

µ

=µ

. (4)

Дальнейшие исследования сводятся к анализу уравнений (3

) или (4).

Для этого проводят исследования и строят зависимость вида

µ = f( S

1

;S

2

) (рис. 1.2).

МОДУЛЬ 1. ВВЕДЕНИЕ В ПРЕДМЕТ «БИОТЕХНОЛОГИЯ

Работа 1.3. Фазы роста микробиологических культур и расчет кинетических параметров



Введение в биотехнологию. Метод. указания по лабораторным работам

-13-

0

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

µ, ч

-1

0

1

2

3

4

5

6

7

S

1

, кг

/м

3

- 1

- 2

- 3

- 4

8

9

Рис.1.2. Изменение удельной скорости роста суммарной биомассы

от концентрации фруктозы S

1

. Экспериментальные точки (1–4):

1 – S

2

= 1,2 кг/м

3

; 2 – 0,6; 3 – 0,4; 4 – 0,2

Обработка экспериментальных данных (рис. 1.3

–1.4) позволяет полу-

чить значения эффективных констант сродства микроорганизма к субстратам

K

1

и K

2

.

2

4

6

8

10

0

1

2

3

4

5

1/X

аз

, м

3

/кг

фрm

фраз

m

аз

X

KK

K

tg

µµ

ϕ

+=

1/µ, ч

- 1

- 2

- 3

Рис. 1.3. Зависимость удельной скорости роста суммарной биомассы

от концентрации субстратов в обратных координатах. Точки (1 – 3, данные рис.1.2):

1 – X

фр

= 1кг/м

3

; 2 – 2,5; 3 – 8. Точки (1 – 3): 1 – X

фр

= 1кг/м

3

; 2 – 2,5; 3 – 8

3.5

4

.5

0

1

3

4

5

1/X

аз

,м

3

/г

µ

m

= 1/3.6 ; K

аз

= µ

m

× tg

ϕ

= 0.277×0.18 = 0.05

1/µ

m

, ч

Рис. 1.4. Зависимость кинетических параметров 1/µ

m

от 1/X

аз

М

а

т

е

р

и

а

л

ы

и

о

б

о

р

у

д

о

в

а

н

и

е

:

1. Музейная культура штамма R. eutrophus B-5786;

2. Стерильный раствор базового фосфатного буфера для среды;

МОДУЛЬ 1. ВВЕДЕНИЕ В ПРЕДМЕТ «БИОТЕХНОЛОГИЯ

Работа 1.3. Фазы роста микробиологических культур и расчет кинетических параметров



Введение в биотехнологию. Метод. указания по лабораторным работам

-14-

3. Маточные стерильные растворы микроэлементов, железа лимонно-

кислого, сульфата магния и хлористого аммония;

4. Шпатели, спиртовка, мерная посуда, пипетки, колбы для выращива-

ния бактерий, резиновые пробки с микробиологическими фильтрами;

5. Термостатируемая качалка.

Х

о

д

р

а

б

о

т

ы

:

1. Разделиться на 4 группы по числу заданных значений концентрации

хлористого аммония в среде (0,2; 0,4; 0,6 и 1,2 кг/м

3

) и концентрации фрукто-

зы (1; 2; 4; 8 кг/м

3

).

2. Каждой группе приготовить варианты питательной среды для бакте-

рий с заданным значением концентраций фруктозы и азота:

– в микробиологическом боксе к 0,5 л среды в стерильных условиях

над спиртовкой добавить 2,5 мл стандартного раствора железа, 1,5 мл рас-

твора микроэлементов, 2 мл раствора сульфата магния и требуемый объем

раствора хлорида аммония (в 1 мл которого содержится 100 мг соли);

– около 200 мл среды отбросить;

– оставшиеся 300 мл среды засеять инокулятом, смыв культуру с одно-

го музейного “косяка”(использовать шпатели);

– инокулят разлить в ферментационные колбы объемом 100 мл;

– колбы плотно закрыть пробками;

– колбы подписать согласно номеру эксперимента;

– на ФЭК измерить оптическую плотность (без разведения) каждого

инокулята;

– колбы установить на качалку.

3. По истечении 15 часов культивирования через каждые 30 мин (осу-

ществить четыре повторности) провести измерения оптической плотности

культуры и по калибровочной кривой определить концентрацию биомассы в

культуре, а затем рассчитать удельную скорость роста µ, ч

-1

.

4. Данные представить в виде графической зависимости (рис.1.2).

5. Построить зависимости 1/ µ = f (1/S

1

) и 1/ µ= f (1/S

2

) и определить вид

механизма и константы, входящие в уравнения (3) или (4).

6. Оформить работу и сделать выводы.

В

о

п

р

о

с

ы

:

1. Какими методами определяют удельную скорость роста микроорга-

низмов?

2. Периодическое и непрерывное культивирование.

3. Модели роста культуры.

Р

а

б

о

т

а

1

.

3

.

Ф

а

з

ы

р

о

с

т

а

м

и

к

р

о

б

и

о

л

о

г

и

ч

е

с

к

и

х

к

у

л

ь

т

у

р

и

р

а

с

ч

е

т

к

и

н

е

т

и

ч

е

с

к

и

х

п

а

р

а

м

е

т

р

о

в

Ц

е

л

ь

р

а

б

о

т

ы

ы: знакомство с циклом развития микробных культур и спе-

цификой фаз периодической культуры.

МОДУЛЬ 1. ВВЕДЕНИЕ В ПРЕДМЕТ «БИОТЕХНОЛОГИЯ

Работа 1.3. Фазы роста микробиологических культур и расчет кинетических параметров



Введение в биотехнологию. Метод. указания по лабораторным работам

-15-

В простой гомогенной периодической культуре все ее части находятся

в одинаковых условиях. Различные фазы роста такой культуры (рис. 1.5)

отражают изменения в биомассе и в окружающей среде.

Периодическая культура начинается с лаг-фазы, которая является со-

вершенно необязательной фазой роста. Ее возникновение зависит от несо-

блюдения оптимальных условий для роста посевного материала. Происхо-

дит перепад концентраций элементов питания, особенно углеродного, от

сниженных – в выросшей культуре, из которой берется посевной матери-

ал, к высоким – в свежей среде.

Рис 1.5. Фазы на кривой роста периодической культуры: I – лаг-фаза;

II – фаза ускорения роста; III – фаза экспоненциального роста;

IV – фаза замедления роста; V – стационарная фаза; VI – фаза отмирания

Истощенные клетки старого посевного материала должны перейти из

состояния голодания или отравления в состояние, соответствующее спо-

собности к размножению, которое определяется необходимым количест-

вом и состоянием рибосом, способностью и условиями к репликации хро-

мосом, синтезу клеточной стенки и т. п.

Далее следует экспоненциальная фаза, в наибольшей степени ха-

рактеризующая и выражающая способность культуры к размножению. В

этой фазе сведены к минимуму все лимитирующие и ингибирующие влия-

ния. Компоненты питательной среды имеются в избытке, продукты обмена

еще не накопились. Рост идет с максимально возможной скоростью, гене-

тически заложенной в клетке. Если же среда по своему начальному соста-

ву не оптимальна, то рост будет ограничен неподходящим питанием или

неоптимальным значением рН и т. п. В этом случае рост может быть

описан более пологой экспонентой или прямой.

Эта фаза в лабораторных условиях не может быть длительной, так

как даже не очень плотная популяция вскоре начнёт испытывать недоста-

ток в кислороде из-за его быстрого поглощения и слабой растворимости.

МОДУЛЬ 1. ВВЕДЕНИЕ В ПРЕДМЕТ «БИОТЕХНОЛОГИЯ

Работа 1.3. Фазы роста микробиологических культур и расчет кинетических параметров



Введение в биотехнологию. Метод. указания по лабораторным работам

-16-

Фаза замедления роста может быть очень разнообразной и самой

сложной. Она может полностью отсутствовать на простых синтетических

средах, когда рост сразу останавливается из-за отсутствия одного элемента

питания, в особенности – источника углерода и энергии. Рост клеток пре-

кращается, и наступает стационарная фаза, в данном случае – фаза голода-

ния по использованному элементу питания. На сложных средах, содержа-

щих несколько источников углерода, может происходить поочередная их

утилизация и постепенное замедление роста. При избытке питания рост

замедляется из-за накопления продуктов метаболизма. Токсичные продук-

ты метаболизма у микроорганизмов весьма разнообразны. Возможно одно-

временное отравление и голодание. В соответствии с этим и стационарная

фаза может содержать самые разнокачественные клетки: живые, но голо-

дающие, живые, но ингибированные, отмирающие по причине голодания или

отравления. Стационарная фаза не характеризует культуру, так как в этот

период состояние клеток может быть самым разнообразным. Только экс-

поненциальная фаза до некоторой степени характеризует свойства культуры.

Таким образом, клетки периодической культуры претерпевают значи-

тельные изменения всех свойств по всему периоду роста, обусловленные

непрерывными изменениями окружающей среда и быстрой реакцией на них

клеток. Тем не менее периодические методы культивирования микроорга-

низмов широко используются в настоящее время в промышленной биотех-

нологии и исследовательской практике. Техника периодической культуры

позволяет получить исходные данные, и расходные коэффициенты, и кине-

тические характеристики культуры, необходимые для перехода к проточным

системам и масштабированию процесса.

М

а

т

е

р

и

а

л

ы

и

о

б

о

р

у

д

о

в

а

н

и

е

:

1. Музейная культура штамма R. eutrophus B-5786;

2. Стерильный раствор базового фосфатного буфера для среды;

3. Маточные стерильные растворы микроэлементов, железа лимонно-

кислого, сульфата магния и хлористого аммония;

4. Шпатели, спиртовка, мерная посуда, пипетки, колбы для выращи-

вания бактерий, резиновые пробки с микробиологическими фильтрами;

5. Термостатируемая качалка.

Х

о

д

р

а

б

о

т

ы

:

1. Приготовить питательную среду для выращивания бактерий:

– в микробиологическом боксе к 0,5 л основной среды (фосфатный

буфер) в стерильных условиях над спиртовкой добавить 2,5 мл стандартного

раствора железа, 1,5 мл раствора микроэлементов, 2 мл раствора сульфата

магния и требуемый объем раствора хлорида аммония (в 1 мл которого со-

держится 100 мг соли); углеродный субстрат ( из расчета 10 г/л фруктозы);

– инокулят разлить в 10 ферментационных колб по 100 мл (10 колб для

периодической культуры), используя стерильную мерную посуду;

МОДУЛЬ 1. ВВЕДЕНИЕ В ПРЕДМЕТ «БИОТЕХНОЛОГИЯ

Работа 1.3. Фазы роста микробиологических культур и расчет кинетических параметров



Введение в биотехнологию. Метод. указания по лабораторным работам

-17-

– колбы плотно закрыть ватно-марлевыми пробками;

– колбы подписать (например, 1а, 1б, 1в и т. д.);

– измерить исходную оптическую плотность культуры.

2. Колбы установить на качалку.

3. Периодически производить отбор проб для измерения оптической

плотности культуры на ФЭК и микроскопирования клеток. В колбы, предна-

значенные для подпитки, через 12, 24 и 36 ч после начала культивирования

внести дополнительный субстрат (раствор фруктозы из расчета 10 г/л).

4. Данные занести в табл. 1.4

.

Таблица 1.4

Показатели роста культуры R.eutropha в ходе развития периодической культуры

Группа

Исходные

Показатели

инокулята

Текущие

показатели

культуры

ОП

Х, г/л

ОП

Х, г/л

№ 1. Время от на-

чала опыта, ч

1

2

3

4

5

5. По результатам эксперимента построить кривые роста культур

(по накопления биомассы в культуре) бактерий.

В

о

п

р

о

с

ы

:

1. Какие исследования позволяет проводить техника периодического

культивирования микроорганизмов?

2. В чем «узкие» места периодической культуры?

3. Каковы отличия и преимущества периодического режима культи-

вирования микроорганизмов с подпиткой субстратом, тубулярной культу-

ры и непрерывных культур?



Введение в биотехнологию. Метод. указания по лабораторным работам

-18-

М

О

Д

У

Л

Ь

2

.

П

Р

О

М

Ы

Ш

Л

Е

Н

А

Я

М

И

К

Р

О

Б

И

О

Л

О

Г

И

Я

Ц

е

л

ь

– продемонстрировать методы и возможности промышленной

микробиологии; ознакомить с типами управляемого культивирования микро-

организмов для получения кинетических констант, расчета параметров био-

технологических процессов и получения целевых продуктов.

З

а

д

а

ч

и

:

– обучение технике культивирования микроорганизмов в проточных режимах;

– продемонстрировать возможности методологии теоретико-

экспериментального подхода для нахождения продукционных характеристик

и кинетических констант продуцирующей микробной культуры в условиях

оптимального и лимитированного по субстрату роста;

– обучение методам влияния параметров ферментации и состава пита-

тельных сред на биохимическую программу синтеза клеточных основных и

запасных макромолекул;

– ознакомление с современными методами выделения и очистки целе-

вых продуктов из микробной биомассы;

– освоение методов количественного анализа внутриклеточного пула

макромолекул (белков, полисахаров, биополимеров).

Р

а

б

о

т

а

2

.

1

.

Т

и

п

ы

ф

е

р

м

е

н

т

а

ц

и

о

н

ы

х

п

р

о

ц

е

с

о

в

Ц

е

л

ь

р

а

б

о

т

ы

ы: дать представление о технике и методах культивирования

микроорганизмов.

Стадия ферментации является основной стадией в биотехнологическом

процессе. На этой стадии происходит взаимодействие продуцента с субстра-

том и образование целевых продуктов (биомасс, эндо- и экзопродуктов). Эта

стадия осуществляется в биохимическом реакторе (ферментере) и может

быть организована в зависимости от особенностей используемого продуцен-

та и требований к типу и качеству конечного продукта различными способа-

ми.

Ферментация может проходить в строго асептических условиях или без

соблюдения правил стерильности (так называемая «незащищенная» фермента-

ция). Ферментация может осуществляться на жидких (жидкофазная) и на твер-

дых (твердофазная) средах; анаэробно и аэробно. Аэробная ферментация может

протекать поверхностно или глубинно (во всей толще питательной среды).

Обеспечение процесса ферментации сводится к дозированному посту-

плению в ферментер потоков (инокулята, воздуха (или газовых смесей), пи-

тательных биогенов, пеногасителей) и отвода из него тепла, отработанного

воздуха, культуральной жидкости, а также измерению и стабилизации основ-

ных параметров процесса на уровне, требуемом для оптимального развития

продуцента и образования целевого продукта.

Принципиальная технологическая схема ферментационного процесса

представлена на рис. 2.1

.

МОДУЛЬ 2. ПРОМЫШЛЕННАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

Работа 2.1. Типы ферментационных процессов



Введение в биотехнологию. Метод. указания по лабораторным работам

-19-

Рис. 2.1. Принципиальная схема реализации биотехнологических процессов:

1 – реактор для приготовления сред, 2 – вихревой насос, 3 – аппарат для приготовления

твердых сред, 4 – паровая колонка для подогрева сред до температуры стерилизации,

5 – выдерживатель сред при температуре стерилизации, 6 – теплообменник для охлажде-

ния сред, 7 – мерник – сборник питательной среды, 8 – дозатор, 9 – анаэробный фермен-

тер, 10 – глубинный аэробный ферментер, 11 – биокаталитический реактор, 12 – фермен-

тер для поверхностной твердофазной ферментации, 13 – то же для поверхностной жидко-

стной ферментации, 14 – экстрактор, 15 – сепаратор для отделения биомассы, 16 – система

локальной автоматики, 17 – плазмолизатор биомассы, 18 – дезинтегратор биомассы, 19 –

выпарная установка, 20 – фракционирование дезинтегратов, 21 – сушилка и другие аппа-

раты для обезвоживания, 22 – аппаратура для расфасовки продукта, 23 – ионообменные

колонны, аппараты для химических и мембранных методов выделения, центрифуги,

фильтры, кристаллизаторы и др. устройства.

Условные обозначения: рН – раствор для коррекции рН, П – компоненты и среды для

подпитки, Пос – посевной материал, В – сжатый воздух, ПАВ – пеногаситель,

Ср – стерильная питательная среда, БА – биологический агент

к

1

6

к

1

6

к

1

6

к

1

6

П

е

р

е

д

а

в

л

и

в

а

н

и

е

В

р

Н

р

Н

С

р

С

р

С

р

П

о

с

П

о

с

П

о

с

П

А

В

а

к

у

м

8

9

4

5

6

7

8

2

3

1

3

1

8

2

0

1

5

1

7

1

9

1

4

Т

е

н

з

о

д

а

т

ч

и

к

О

т

х

о

д

ы

н

а

б

и

о

-

д

е

г

р

а

д

а

ц

и

ю

И

н

ф

о

р

м

а

ц

и

я

У

п

р

а

в

л

е

н

и

е

2

1

2

С

А

Р

(

Э

В

М

)

А

С

У

Т

П

У

с

т

а

н

о

в

к

а

п

а

р

а

м

е

т

р

о

в

,

в

т

.

ч

.

п

о

м

а

т

.

м

о

д

е

л

я

м

2

П

р

о

д

у

к

т

ы

р

а

з

л

и

ч

н

о

й

с

т

е

п

е

н

и

к

о

н

ц

е

н

т

р

и

-

р

о

в

а

н

и

я

и

о

ч

и

с

т

к

и

2

3

1

6

К

о

н

ц

е

н

-

т

р

а

т

ы

Б

и

о

м

а

с

ы

(

к

о

р

м

о

в

ы

е

и

ж

и

в

ы

е

)

,

в

а

к

ц

и

н

ы

1

2

1

0

Г

а

з

о

б

р

а

з

н

ы

е

п

р

о

д

у

к

т

ы

МОДУЛЬ 2. ПРОМЫШЛЕННАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

Работа 2.1. Типы ферментационных процессов



Введение в биотехнологию. Метод. указания по лабораторным работам

-20-

М

а

т

е

р

и

а

л

ы

и

о

б

о

р

у

д

о

в

а

н

и

е

:

1. Термостатируемая качалка-шейкер для культивирования микроор-

ганизмов;

2. Лабораторный ферментационный комплекс «Bio- Flo”;

3. Опытное производство биополимеров.

Х

о

д

р

а

б

о

т

ы

:

Проведение экскурсии и знакомство с типами ферментационных процессов:

- периодическим аэробным жидкофазным;

- проточным в лабораторном ферментере на гетеротрофном субстрате;

- проточном в лабораторном ферментере на газовом субстрате;

- посещение опытного производства биополимеров.

Р

а

б

о

т

а

2

.

2

.

П

е

р

и

о

д

и

ч

е

с

к

о

е

к

у

л

ь

т

и

в

и

р

о

в

а

н

и

е

м

и

к

р

о

р

г

а

н

и

з

м

о

в

и

к

у

л

ь

т

и

в

и

р

о

в

а

н

и

е

с

п

о

д

п

и

т

к

о

й

с

у

б

с

т

р

а

т

о

м

Ц

е

л

ь

р

а

б

о

т

ы

ы: обучение технике культивирования микроорганизмов в

режиме периодического процесса.

Культуры микроорганизмов можно подразделять на «открытые» и «за-

крытые» системы. Закрытой называют такую систему, в которой хотя бы

один из существенных компонентов не может ни поступать в систему, ни по-

кидать ее. Простая периодическая культура, содержащая ограниченное пер-

воначальное количество питательного субстрата, служит примером закрытой

системы. В закрытой системе скорость роста биомассы должна стремиться к

нулю либо из-за недостатка субстрата, либо из-за непереносимости продукта

при его дальнейшем накоплении. Такие системы всегда находятся в неустой-

чивом состоянии. Процесс выращивания микроорганизмов до недавнего

времени представлялся довольно простым, идущим через ряд принципиально

общих стадий, приводящих к получению из ничтожного количества посевно-

го материала значительного количества биомассы или биомассы и продуктов

метаболизма. Кривая роста – это суммарная запись истории роста культуры.

Фазы роста не столько изучались, сколько просто описывались.

После лаг-периода наблюдается максимальная скорость роста, затем

рост прекращается либо из-за недостатка источников питания, либо из-за на-

копления ингибирующих продуктов, либо из-за некоторых изменений в фи-

зических свойствах среды. После того как биомасса достигнет максимума,

наступает стационарная фаза, в которой количество биомассы остается по-

стоянным. Затем, раньше или позже, количество биомассы уменьшается в

результате метаболических процессов, связанных с поддержанием жизне-

деятельности, или автолиза. Продолжительность экспоненциального роста

частично зависит от начальной концентрации субстрата, лимитирующего

рост. Кажущееся замедление роста, стационарная фаза и фаза отмирания мо-

гут наступить, если возникнут некоторые условия, летальные для организ-

Волова Т.Г. Введение в биотехнологию. Методические указания по лабораторным работам

Подождите немного. Документ загружается.