Другов Ю.С., Родин А.А. Пробоподготовка в экологическом анализе

òîâ íà êàïèëëÿðíîé êîëîíêå (10,3 ì × 0,2 ìì) ñ ïîëèýòèëåíãëèêîëåì Supelcowax

(ïëåíêà 0,2 ìêì) ïðè òåìïåðàòóðå 55°Ñ. Ãàç-íîñèòåëü ãåëèé (1 ìë/ìèí), äåòåêòîð

ÌÑÄ (m/z = 30–70). Ïîëó÷åííàÿ â ýòèõ óñëîâèÿõ õðîìàòîãðàììà ïðèâåäåíà íà

ðèñ. IV.2.

Îêîí÷àíèå îïðåäåëåíèÿ ìîæåò âûïîëíÿòüñÿ è ñ ïîìîùüþ ÃÕ/ÏÈÄ [45], à äëÿ

ðàçäåëåíèÿ íèçøèõ ñïèðòîâ èñïîëüçóþò êàïèëëÿðíûå êîëîíêè ñ ÏÝÃ èëè FFAP

(ïîïåðå÷íîñøèòûé ÏÝÃ, îáðàáîòàííûé òåðåôòàëåâîé êèñëîòîé) â èçîòåðìè÷å-

ñêîì ðåæèìå èëè ñ ïðîãðàììèðîâàíèåì òåìïåðàòóðû. Â ïåðâîì ñëó÷àå (õðîìà-

òîãðàììà íà ðèñ. IV.3-A) ñïèðòû Ñ

1

–Ñ

3

(âàðèàíò ïðîáîïîäãîòîâêè ÏÔÀ/ÒÔÌÝ)

644 Ãëàâà IV. Áèîñðåä

Ðèñ. IV.2. Õðîìàòîãðàììà

ñïèðòîâ â êðîâè, ïîëó-

÷åííàÿ ìåòîäîì ÏÔÀ/ÃÕ/

ÌÑ ïîñëå èõ èçâëå÷åíèÿ ñ

ïîìîùüþ ÒÔÌÝ [44]. Ïîÿñ-

íåíèÿ â òåêñòå.

Ðèñ. IV.3. Õðîìàòîãðàììà ñïèðòîâ, ïîëó÷åííàÿ ïîñëå èçâëå÷ñåíèÿ èõ èç êðîâè ìåòîäîì

ÏÔÀ/ÒÔÌÝ [45]. Ïîÿñíåíèÿ â òåêñòå.

ðàçäåëÿëè íà êàïèëëÿðíîé êîëîíêå èç ïëàâëåííîãî êâàðöà (10 ì × 0,53 ìì) ñ

FFAP ïðè òåìïåðàòóðå 50°Ñ ñ ÏÈÄ. Ãàç-íîñèòåëü Íå (6,6 ìë/ìèí).

Âî âòîðîì ñëó÷àå (õðîìàòîãðàììà íà ðèñ. IV.3-Á) àíàëèò îïðåäåëÿëè ìåòîäîì

ÏÔÀ/ÒÔÌÝ/ÃÕ/ÏÈÄ ñ ïðèìåíåíèåì êàïèëëÿðíîé êîëîíêè (15 ì õ 0,25 ìêì) ñ

HP-INNO Wax (ïîïåðå÷íîñøèòûé ïîëèýòèëåíãëèêîëü, ïëåíêà 0,5 ìêì) ïðè ïðî-

ãðàììèðîâàíè òåìïåðàòóðû ñ èñïîëüçîâàíèåì â êà÷åñòâå ãàçà-íîñèòåëÿ ãåëèÿ (34

ñì/ñ èëè 1,2 ìë/ìèí). Òåìïåðàòóðà ÏÈÄ 275°Ñ, èñïàðèòåëÿ 250°Ñ.

Àíàëîãè÷íàÿ ìåòîäèêà (ÏÔÀ/ÃÕ/ÏÈÄ) ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàíà è äëÿ îïðå-

äåëåíèÿ â êðîâè ïàðîâ ðàñòâîðèòåëåé (êåòîíîâ è àðîìàòè÷åñêèõ óãëåâîäîðîäîâ)

[45]. Ïðîáà êðîâè (1 ìë) ïîñëå äîáàâëåíèÿ âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà (100 ìêë 1-áóòà-

íîëà) â âèäå ïàðîâ ââîäèòñÿ â èñïàðèòåëü ãàçîâîãî õðîìàòîãðàôà ñ ÏÈÄ (220°Ñ) è

êàïèëëÿðíîé êîëîíêîé (30 ì õ 0,53 ìì) ñ HP-INNOWax (ïëåíêà 1 ìêì). Ðàçäåëå-

íèå îñóùåñòâëÿåòñÿ ïðè ïðîãðàììèðîâàíèè òåìïåðàòóðû (õðîìàòîãðàììà íà ðèñ.

IV.4). Ãàç-íîñèòåëü Íå (25 ñì/ñ èëè 3,4 ìë/ìèí).

×óâñòâèòåëüíîå è áûñòðîå îïðåäåëåíèå ýòàíîëà â êðîâè, ñûâîðîòêå êðîâè,

ìî÷å è æèäêîñòè íàä ôåêàëèÿìè [46] ìåòîäîì ÃÕ/ÏÈÄ îñíîâàíî íà ïðÿìîì ââå-

äåíèè ïðîáû â èñïàðèòåëü ãàçîâîãî õðîìàòîãðàôà, çàïîëíåííûé ñòåêëÿííûìè

øàðèêàìè, îáðàáîòàííûìè ôîñôîðíîé êèñëîòîé, ïðè òåìïåðàòóðå 120° èëè 60°Ñ.

Äåòåêòîð ÏÈÄ, ãàç-íîñèòåëü àçîò (20 ìë/ìèí). Ïðåäåë îïðåäåëåíèÿ 0,1 ìã/ë ïðè

îáúåìå ïðîáû 5 ìêë. Îäíîâðåìåííî ñ ýòàíîëîì â îáðàçöàõ êðîâè ìîæíî îïðåäå-

ëÿòü ìåòàíîë, óêñóñíóþ êèñëîòó è àöåòîí.

Ìåòîäàìè ãàçîâîé è èîííîé õðîìàòîãðàôèè îïðåäåëÿëè òðè-í-áóòèëôîñôàò

è õîëàò íàòðèÿ â ðàñòâîðå ïðîòåèíîâ ïëàçìû [47]. Ïðåäâàðèòåëüíî ýòè âåùåñòâà

èçâëåêàëè èç ìàòðèöû ìåòîäîì ÒÔÝ (ñì. ðàçäåë 2.3 â ãëàâå II) â êîëîíêå ñ ñèëèêà-

ãåëåì Ñ18 ñ ïîñëåäóþùèì óäàëåíèåì (ïðîìûâêà) ïðîòåèíîâ âîäîé. Çàòåì öåëåâûå

êîìïîíåíòû ýëþèðîâàëè èç êîëîíêè ñ Ñ18 ãåêñàíîì, ýëþàò êîíöåíòðèðîâàëè â

êîëîíêå ìåíüøåãî ðàçìåðà, èçâëåêàëè åãî ñïèðòîì è àíàëèçèðîâàëè êîíå÷íûé

Êðîâü è ìî÷à 645

Ðèñ. IV.4. Õðîìàòîãðàììà

ðàñòâîðèòåëåé, ïîëó÷åííàÿ

ìåòîäîì ÃÕ/ÏÈÄ ïîñëå

èõ âûäåëåíèÿ èç êðîâè ñ

ïîìîùüþ ÏÔÀ [45]. Ïîÿñ-

íåíèÿ â òåêñòå.

ýëþàò ìåòîäîì ãàçîâîé èëè èîííîé õðîìàòîãðàôèè.

1.3. Íåîðãàíè÷åñêèå ñîåäèíåíèÿ

Îðèãèíàëüíàÿ ìåòîäèêà ïàðîôàçíîãî ðåàêöèîííî-õðîìàòîãðàôè÷åñêîãî îïðå-

äåëåíèÿ HCN â êðîâè [48, 49] îñíîâàíà íà ïðåâðàùåíèè HCN â CNCl â ôîðêî-

ëîíêå-ðåàêòîðå ñ õëîðàìèíîì Ò è ôèêñèðîâàíèè ïðîèçâîäíîãî ñ ïîìîùüþ ÝÇÄ.

Ôîðêîëîíêà âûïîëíåíà èç ñòåêëà è ïîìåùåíà â èñïàðèòåëü õðîìàòîãðàôà, ãäå

è ïðîèñõîäèò ðåàêöèÿ çàìåùåíèÿ ïðè òåìïåðàòóðå 100°Ñ ñðàçó æå ïîñëå âîäà â

èñïàðèòåëü õðîìàòîãðàôà ïðîáû êðîâè. Ðàçäåëåíèå êîìïîíåíòîâ, ñîäåðæàùèõ-

ñÿ â àíàëèçèðóåìîé êðîâè, îñóùåñòâëÿëè íà ñòåêëÿííîé êîëîíêå (3 ì × 3 ìì) ñ

Ãàëêîìèäîì Ì-18 íà õðîìîñîðáå W ïðè 55°Ñ è ðàñõîäå ãàçà-íîñèòåëÿ (àçîò) 30

ìë/ìèí (ðèñ. IV.5).

Êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå HCN ïðîâîäèëè ìåòîäîì âíóòðåííåãî ñòàíäàð-

òà, â êà÷åñòâå êîòîðîãî èñïîëüçîâàëè äèõëîðìåòàí. Ìåòðîëîãè÷åñêèå õàðàêòåðè-

ñòèêè ìåòîäèêè ìîæíî îöåíèòü ïî ðåçóëüòàòàì íåñêîëüêèõ îïðåäåëåíèé, ïðåä-

ñòàâëåííûõ â òàáë. IV.3.

Íèæíèé ïðåäåë äåòåêòèðîâàíèÿ HCN, âû÷èñëåííûé èç ãðàäóèðîâî÷íîé êðè-

âîé, ðàâåí 0,05 ìêã/ìë. Ôîðêîëîíêà ñ õëîðàìèíîì Ò íå èçìåíÿåò ñâîèõ ñâîéñòâ

â òå÷åíèå íåñêîëüêèõ ìåñÿöåâ, à ãðàäóèðîâî÷íàÿ êðèâàÿ ëèíåéíà, åñëè â êà÷åñòâå

âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà èñïîëüçóþò äèõëîðìåòàí è ÝÇÄ (íèêåëü-63). Äåòåêòîð è

èñïàðèòåëü íàãðåâàþò äî 100°Ñ.

Òàáëèöà IV.3. Òî÷íîñòü è âîñïðîèçâîäèìîñòü ðåàêöèîííî-õðîìàòîãðàôè÷åñêîãî îïðåäåëåíèÿ HCN

â êðîâè [48]

Ââåäåíî HCN, n Íàéäåíî HCN, S, Êîýôôèöèåíò

ìêã/ìë ìêã/ìë ìêã/ìë âàðèàöèè

0,22 5 0,18 0,007 3,9

1,11 5 1,15 0,019 1,7

646 Ãëàâà IV. Áèîñðåä

Ðèñ. IV.5. Õðîìàòîãðàììà êðîâè, ñîäåðæà-

ùåé 1 ìêã/ìë HCN: 1-âîçäóõ; 2 — õëîðöèàí;

3 — ìåòèëåíõëîðèä; (âíóòðåííèé ñòàíäàðò)

[48].

2,22 5 2,28 0,013 0,6

Â ðàáîòå [50] ñðàâíèâàëè õàðàêòåðèñòèêè äâóõ ìåòîäèê îïðåäåëåíèÿ HCN â

êðîâè — õðîìàòîãðàôè÷åñêîé [50, 51] è ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêîé [50]. Ïåðâàÿ

ïðåäóñìàòðèâàåò ïîñòðîåíèå ãðàäóèðîâî÷íîãî ãðàôèêà íà îñíîâå àíàëèçà ðàâíîâåñ-

íîãî ïàðà, îáðàçóþùåãîñÿ ïðè âçàèìîäåéñòâèè ýòèëðîäàíèäà ñ äèòèîòðåíòîëîì (â

áóôåðíîì ðàñòâîðå, ñîäåðæàùåì ÝÄÒÀ) ïðè 60°Ñ â òå÷åíèå 15 ìèí. Îáðàçóþùèåñÿ

ëåòó÷èå ïðîäóêòû àíàëèçèðîâàëè íà êàïèëëÿðíîé êîëîíêå (25 ì × 0,53 ìì) ñ Ïîðàï-

ëîòîì Q ïðè 100°Ñ è ïðèìåíåíèè ÒÈÄ (ãåëèé 5 ìë/ìèí).

Ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêàÿ ìåòîäèêà îñíîâàíà íà âçàèìîäåéñòâèè HCN (ñì.

âûøå) ñ õëîðàìèíîì Ò, ââåäåíèè îêðàøåííîãî ðåàãåíòà (áàðáèòóðîâàÿ êèñëîòà

â ðàñòâîðå ïèðèäèí — 12 Ì HCl) è èçìåðåíèè îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ïðîäóêòà

ðåàêöèè ïðè 580 íì.

Àíàëèç 20 îáðàçöîâ êðîâè ïî îáåèì ìåòîäèêàì ïîêàçàë, ÷òî ìåæäó ïîëó÷åí-

íûìè ðåçóëüòàòàìè íåò âèäèìûõ ñòàòèñòè÷åñêèõ ðàçëè÷èé. Ïðàâäà, ó ãàçîõðîìà-

òîãðàôè÷åñêîé ìåòîäèêè ëó÷øèå ìåòðîëîãè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêè: Ñ

Í

ðàâåí 1,5

ïìîëü è 1,1 íìîëü ïðè îòíîñèòåëüíîì ñòàíäàðòíîì îòêëîíåíèè 0,05 è 0,08 ñîîò-

âåòñòâåííî, à âðåìÿ àíàëèçà ïî ïåðâîé ìåòîäèêå ñîñòàâëÿåò 8 ìèí, â òî âðåìÿ êàê

ñïåêòðîôîòîìåòðèðîâàíèå çàíèìàåò áîëåå 2-õ ÷ [50].

Â îáðàçöàõ öåëüíîé êðîâè îïðåäåëÿëè HCN ìåòîäîì ÏÔÀ/ÃÕ/ÒÈÄ ñ èñïîëü-

çîâàíèåì êðèîãåííîé ïå÷è [52]. Ïðè íèçêîé òåìïåðàòóðå ïå÷è (îò –30° äî 160°Ñ)

ìîæíî áåç ïîòåðü ââîäèòü â êàïèëëÿðíóþ êîëîíêó 5 ìë ðàâíîâåñíîãî ïàðà, ÷òî

ïîçâîëÿåò â 10–100 ðàç ïîâûñèòü ÷óâñòâèòåëüíîñòü ïî ñðàâíåíèþ ñ òðàäèöèîí-

íûìè ìåòîäèêàìè. Ïðè ïðèìåíåíèè â êà÷åñòâå âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà ïðîïèî-

íèòðèëà Ñ

Í

ðàâåí 2 íã/ìë äëÿ S

r

= 0,029–0,118. Ìåòîäèêó èñïîëüçóþò òàêæå äëÿ

àíàëîãè÷íûõ èçìåðåíèé â ñóäåáíîé ìåäèöèíå.

Ìåòîä ÏÔÀ/ÃÕ ÷àùå äðóãèõ ïðèìåíÿþò äëÿ îïðåäåëåíèÿ òîêñè÷íûõ âåùåñòâ

áèîñðåäàõ, íàïðèìåð, äëÿ èçìåðåíèÿ ñîäåðæàíèé ôòîðèä-èîíîâ â êðîâè è ìî÷å

[53]. Ìåòîäèêà îñíîâàíà íà èñïîëüçîâàíèè êîìáèíàöèè ÏÔÀ/ÃÕ/ÏÈÄ/ ÝÇÄ. Ýêñ-

òðàêöèÿ ñîäåðæàùèõñÿ â ñûâîðîòêå êðîâè ôòîðèäîâ òðèìåòèëõëîðñèëàíîì (ïðåâðà-

ùåíèå ðåàêöèîííîñïîñîáíîãî ôòîðà â èíåðòíîå ëåòó÷åå ïðîèçâîäíîå — òðèìåòèëô-

òîðñèëàí) äàåò âîçìîæíîñòü îïðåäåëÿòü ôòîðèäû (òàáë. IV.4) ïðè èõ ñîäåðæàíèÿõ íà

óðîâíå 10–50 íã (îêîëî 15 íã/ë) [62].

Òàáëèöà IV.4. Îïðåäåëåíèå ôòîðèäîâ â ñûâîðîòêå êðîâè [62]

Îáúåì ïðîáû, ìë Ñîäåðæàíèÿ ôòîðèäîâ Ñ, íã/ìë S

r

íã íã/ìë

0,5 8,0 16,0

1,0 14,5 14,5 14,4 0,9

2,0 25,5 12,8

Àíàëîãè÷íîå îïðåäåëåíèå öèàíèä-èîíîâ èëè öèàíèäíûõ êîìïëåêñîâ ìåòàë-

ëîâ ìîæåò áûòü âûïîëíåíî ìåòîäîì èîííîé õðîìàòîãðàôèè [54] èëè ñ ïîìîùüþ

êàïèëëÿðíîãî ýëåêòðîôîðåçà [45, 55]. Íà ðèñ. IV.6 ïðåäñòàâëåíà ýëåêòðîôîðåã-

ðàììà ñìåñè àíèîíîâ (áðîìèä-, õëîðèä-, ñóëüôàò-, ôòîðèä- è ôîñôàò-èîíû),

ïîëó÷åííàÿ ïîñëå èõ èçâëå÷åíèÿ èç ìî÷è (ïîâåðõíîñòíûõ âîä èëè ñíåãà). Èäåíòè-

Êðîâü è ìî÷à 647

ôèêàöèÿ àíèîíîâ îñóùåñòâëÿëàñü ïî ñòàíäàðòíûì âåùåñòâàì (âåðõíÿÿ ÷àñòü õðî-

ìàòîãðàììû). Ðàçäåëåíèå àíèîíîâ ïðîâîäèëè íà êâàðöåâîì êàïèëëÿðå (56/64,5

ñì × 50 ìêì) â áóôåðíîì ðàñòâîðå ïðè íàïðÿæåíèè 30 êÂ ïðè òåìïåðàòóðå 25°Ñ ñ

ÓÔ-äåòåêòîðîì (350/60 íì è 245/10 íì).

Äëÿ ýêñïðåññíîãî îïðåäåëåíèÿ â ìî÷å êðûñ íèòðàòîâ èõ ïðåâðàùàþò â íèòðî-

ìåçèòèëåí, êîòîðûé îïðåäåëÿþò íà êàïèëëÿðíîé êîëîíêå (15 ì × 0,55 ìì) ñ DB-

1701 ïðè (100–125°Ñ) ñ èñïîëüçîâàíèåì ÒÈÄ. Ïðåäåë îáíàðóæåíèÿ ñîñòàâëÿåò

0,5 ìêìîëü [56].

Îïðåäåëåíèå íèòðèòîâ è íèòðàòîâ â ìî÷å, êðîâè, ñëþíå è äð. áèîñðåäàõ ìåòî-

äîì ÃÕ/ÝÇÄ (ïîñëå èõ ïðåâðàùåíèÿ â íèòðîáåíçîë) ñ Ñ

Í

íà óðîâíå ïèêîãðàììîâ

ïîäðîáíî îáñóæäàåòñÿ â ìîíîãðàôèÿõ [57, 61], ñì. òàêæå ãëàâó I.

Íàèáîëåå ðàñïðîñòðàíåííûì ñïîñîáîì àíàëèçà ñëîæíîé ñìåñè èîíîâ (òàáë.

IV.5), âêëþ÷àþùåé áðîìèä-, éîäèä-, öèàíèä-, ðîäàíèä-, íèòðèò- è ñóëüôèä-

èîíû, ÿâëÿåòñÿ ïåðåâîä èõ â ëåòó÷èå ïåíòàôòîðáåíçèëüíûå ïðîèçâîäíûå, êîòî-

ðûå ìîæíî äåòåêòèðîâàòü ñ ïîìîùüþ ÏÈÄ [58] è ÝÇÄ [59]. Â ïîñëåäíåì ñëó÷àå

ïðè àíàëèçå áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ Ñ

Í

íå ïðåâûøàþò íåñêîëüêèõ íã/ìë.

Ìåòîäèêà îñíîâàíà [58-60] íà îáðàçîâàíèè íåéòðàëüíûõ êðèïòàòîâ èç àíèîíîâ

è ïîëèìåðà Êðèïòîôèêñ 222Â, èñïîëüçóåìîãî â êà÷åñòâå ìåæôàçíîãî êàòàëèçà-

òîðà, ñ ïîñëåäóþùèì èçâëå÷åíèåì àíèîíîâ èç âîäíîãî ðàñòâîðà äèõëîðìåòàíîì

äëÿ ïîëó÷åíèÿ ïåíòàôòîðáåíçèëüíûõ ïðîèçâîäíûõ. Õðîìàòîãðàììà ðàçäåëåíèÿ

ïÿòè ôòîðïðîèçâîäíûõ àíèîíîâ ïðåäñòàâëåíà íà ðèñ. IV.7. Óñëîâèÿ ñèíòåçà ïðî-

èçâîäíûõ ïðèâåäåíû â òàáë. IV.6.

648 Ãëàâà IV. Áèîñðåä

Ðèñ. IV.6. Ýëåêòðîôîðåãðàììà àíèîíîâ (ìî÷à — âíèçó) [45]. Ïîÿñíåíèÿ â òåêòñå.

Òàáëèöà IV.5. Ðåàêöèîííî-õðîìàòîãðàôè÷åñêîå îïðåäåëåíèå àíèîíîâ [57]

Îïðåäåëÿåìûå Ðåàãåíò Ïðîèçâîäíîå Õðîìàòîãðàôè÷åñêàÿ Äåòåêòîð

àíèîíû êîëîíêà

Öèàíèäû Àíèëèí, Áåíçîíèòðèë 10% êàðáîâàêñà 20 Ì ÏÈÄ

íèòðèò íàòðèÿ, íà øèìàëèòå W,

ñóëüôàò ìåäè 140°Ñ

Öèàíèä Áðîì Áðîìöèàí Ïîðàïàê Q, 120°Ñ ÝÇÄ

Ðîäàíèä Òî æå Ìåòèëöèàíàò ÒÈÄ

Öèàíèä Äèìåòèëñóëüôàò Ïîðàïàê Q, 155°Ñ ÒÈÄ

Ðîäàíèä Òî æå Ìåòèëòèîöèàíàò

Áîðàò, ñóëüôàò, N-ìåòèë-N- òðåò-Áóòèëäèìåòèë- 3% SE-52 íà ÏÈÄ

ôîñôèò, ôîñôàò, (òðåò-áóòèëäèìåòèë- ñèëèëüíûå Ñóïåëêîïîðòå,

àðñåíèò, àðñåíàò, ñèëèë)òðèôòîð- ïðîèçâîäíûå ïðîãðàììà 120—220°Ñ

âàíàäàò àöåòàìèä (6°/ìèí)

Àðñåíèò, àðñåíàò 2,3-Äèìåðêàïòî- Ìåðêàïòîïðî- 20% SE-30 íà

ïðîïàíîë ïàíèäû ìûøüÿêà õðîìîñîðáå W, 150°Ñ ÏÔÄ

Õëîðèä, áðîìèä, 7-Îêñàáèöèêëî- Ãàëîãåíöèêëî- 3% OV-101 íà ÝÊÄ

éîäèä (4.1.0)ãåïòàí ãåêñàíîëû õðîìîñîðáå W,

(äàëåå ïèðîëèç) ïðîãðàììà 60—100°Ñ

(15°/ìèí)

Ôòîðèä Ãåêñàìåòèëäè- Òðèìåòèëôòîð- 12% NG-100 íà ÏÈÄ

ñèëîêñàí ñèëàí Ïîðîëèòå S, 160°Ñ

Íèòðàò Áåíçîë, ñåðíàÿ Íèòðîáåíçîë 5% íåîïåíòèëãëèêîëü- ÝÇÄ

ñóêöèíàòà íà

õðîìàòîíå N, 150°Ñ

Íèòðèò í-Áðîìàíèëèí, n-Õëîðáðîìáåíçîë 2% OV-17 íà ÝÇÄ

CuCl, HCl õðîìîñîðáå W, 130°Ñ

Ìåòîä ÐÃÕ-èäåíòèôèêàöèè àíèîíîâ, íàïðèìåð, â âèäå ëåòó÷èõ ïåíòàôòîð-

áåíçèëáðîìèäíûõ ïðîèçâîäíûõ, îáëàäàåò áîëüøåé íàäåæíîñòüþ, ÷åì áîëüøèí-

ñòâî âàðèàíòîâ èîííîé õðîìàòîãðàôèè.

Òàáëèöà IV.6. Ïîëó÷åíèå ïåíòàôòîðáåíçèëáðîìèäíûõ (ÏÔÁÁ) ïðîèçâîäíûõ äëÿ ñëåäîâîãî àíàëèçà

Êðîâü è ìî÷à 649

Ðèñ. IV.7. Õðîìàòîãðàììà íåîðãàíè÷åñêèõ àíèîíîâ

â âèäå ëåòó÷èõ ïåíòàôòîðáåíçèëáðîìèäíûõ ïðîèç-

âîäíûõ [58], ïîëó÷åííàÿ íà ñòàëüíîé êîëîíêå (5 ì

× 3 ìì) ñ ñèëèêîíîì DC QF-1 íà õðîìîñîðáå W ïðè

ïðîãðàììèðîâàíèè òåìïåðàòóðû (150–200°Ñ) ñ ÏÈÄ:

1 — éîäèä-èîí; 2 — íèòðèò-èîí; 3 — öèàíèä-èîí; 4 —

ðîäàíèä-èîí; 5 — òåòðàõëîðíèòðîáåíçîë (âíóòðåííèé

ñòàíäàðò); 6 — ñóëüôèä-èîí; 7 — ðåàãåíò (ÏÔÁÁ).

áèîëîãè÷åñêèõ ïðîá ìåòîäîì ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè ñ ÝÇÄ [58]

Àíèîíû Êîëè÷åñòâî Êðèïòîôèêñ 222Â Âðåìÿ Êîëè÷åñòâî Âíóòðåííèé

àíèîíà, ìêìîë ïîëèìåð, ìã ðåàêöèè, ÷ ÏÔÁÁ, ìë ñòàíäàðò, ìêìîë

3,85 10 1,0 2 1*

4,35 12 1,5 4 2

3,45 8 0,5 2 3

1,58 8 0,5 2 4

1,56 8 0,5 4 5

Ñóììà **) 15 2,0 8 6

àíèîíîâ

* 1 — ï-Áðîìéîäáåíçîë (4,2 ìêìîë); 2 — ï-Áðîìéîäáåíçîë (5,3 ìêìîë); 3 — Áèôåíèë (13,7 ìêìîë);

4 — ï-Äèáðîìáåíçîë (3,4 ìêìîë); 5 — 2,3,5,6-òåòðàõëîðíèòðîáåíçîë (9,6 ìêìîë); 6 — 2,3,5,6-òåòðàõëîð-

íèòðîáåíçîë (9,6 ìêìîë).

** Êîëè÷åñòâî àíèîíîâ 1,56—4,35 ìêìîë â 0,2 ìë 2•10

-3

Ì ðàñòâîðà ÊÎÍ.

Ýòî ñâÿçàíî ñ âîçìîæíîñòüþ ïîëó÷åíèÿ ôòîðïðîèçâîäíûõ àíèîíîâ è èõ õðî-

ìàòîãðàôèðîâàíèÿ ñ ñåëåêòèâíûì ÝÇÄ. Èíôîðìàòèâíîñòü òàêîé èäåíòèôèêà-

öèè ìîæåò ïðèáëèæàòüñÿ ê 100%.

2. Âîëîñû

Ðåçóëüòàòû ýïèäåìèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé ïîêàçàëè, ÷òî ñðåäè ïðîôåññèî-

íàëüíûõ èíòîêñèêàöèé ïåðâîå ìåñòî çàíèìàåò ñâèíöîâàÿ. Íàèáîëåå íàäåæíûì

äèàãíîñòè÷åñêèì ïîêàçàòåëåì ñâèíöîâûõ èíòîêñèêàöèé ÿâëÿåòñÿ ñîäåðæàíèåì

ñâèíöà â êðîâè, à êîíöåíòðàöèÿ ñâèíöà â ìî÷å ìàëîèíôîðìàòèâíà, òàê êàê ïîä-

âåðæåíà âëèÿíèþ ðàçëè÷íûõ ôàêòîðîâ. Íàêîïëåíèå ñâèíöà â çóáàõ, âîëîñàõ è

êîñòíîé òêàíè ïðîèñõîäèò ïðè äëèòåëüíîì âîçäåéñòâèè ýòîãî òîêñèêàíòà. Ïîýòî-

ìó ñîäåðæàíèå ñâèíöà â âîëîñàõ ÷åëîâåêà ìîæíî èñïîëüçîâàòü äëÿ îöåíêè ýêîëî-

ãî-ýïèäåìèîëîãè÷åñêîé ñèòóàöèè.

Äëÿ ýêñïðåññíîãî îïðåäåëåíèÿ Pb(2+) â âîëîñàõ ÷åëîâåêà è øåðñòè ñåëüñêî-

õîçÿéñòâåííûõ æèâîòíûõ [110] áûëè ïðèìåíåíû Pb-ñåëåêòèâíûå ýëåêòðîäû ñ

ïëàñòèôèöèðîâàííûìè ìåìáðàíàìè. Íàèáîëåå âûñîêóþ ñåëåêòèâíîñòü ê èîíàì

ñâèíöà (II) ïðîÿâëÿþò ýëåêòðîäû Pb-ÍÔ-100-ÒÔÁ (òåòðàôåíèëáîðàò) — òàáë.

IV.7.

Òàáëèöà IV.7. Êîýôôèöèåíòû ñåëåêòèâíîñòè Pb-ñåëåêòèâíûõ ýëåêòðîäîâ [110]

Ýëåêòðîäû Ìåøàþùèé êàòèîí

Ba

2+

Ca

2+

Mg

2+

Cd

2+

Zn

2+

Na

+

K

+

Pb-ÍÔ-12-ÒÔÁ 1 6 . 10

–2

2 . 10

–1

3 . 10

–2

2. 10

–2

1,6 . 10

–2

2 . 10

–1

Pb-ÍÔ-25-ÒÔÁ 1 . 10

–1

3 . 10

–2

1,5 . 10

–1

8 . 10

–2

2 . 10

–2

1 . 10

–3

2 . 10

–2

Pb-ÍÔ-60-ÒÔÁ 1 . 10

–2

1 . 10

–2

1 . 10

–1

1 . 10

–1

3 . 10

–2

1 . 10

–3

1 . 10

–2

Pb-ÍÔ-100-ÒÔÁ 5 . 10

–3

1 . 10

–2

6 . 10

–2

3 . 10

–1

3 . 10

–2

1 . 10

–3

1 . 10

–2

Íàéäåííûå ñîäåðæàíèÿ ñâèíöà â âîëîñàõ ñîñòàâèëè 15–100 ìêã/ã, à Ñ

Í

ðàâåí

50 ìêã/ë, ÷òî ìåíüøå ñðåäíåãî ñîäåðæàíèÿ ñâèíöà â êðîâè (~100 ìêã/ë) è ìî÷å

(~200 ìêã/ë). Îïðåäåëåíèå ñâèíöà ïðîâîäèëîñü ïîñëå ìîêðîãî ñîææåíèÿ (êîíöåí-

òðèðîâàííàÿ àçîòíàÿ êèñëîòà) àíàëèçèðóåìûõ îáðàçöîâ. Ïðè ñîäåðæàíèÿõ ñâèíöà

650 Ãëàâà IV. Áèîñðåä

â èíòåðâàëå 15-100 ìêã/ã (íàâåñêà âîëîñ îêîëî 0,3 ã) îòíîñèòåëüíîå ñòàíäàðòíîå

îòêëîíåíèå íå ïðåâûøàåò 10%.

Â äðóãîé ìåòîäèêå [110] ïðîáîïîäãîòîâêà äëÿ îïðåäåëåíèÿ â âîëîñàõ 30 õèìè-

÷åñêèõ ýëåìåíòîâ (Be, Cd, Fe, Co, Pb, P, Sn, Sb, As, Ba, Cr è äð.) çàêëþ÷àëàñü â

èõ ìèíåðàëèçàöèè ìåòîäîì ñóõîãî îçîëåíèÿ ïðè 450°Ñ (äî ïîñòîÿííîé ìàññû).

Èçìåðåíèÿ ïðîâîäèëè ìåòîäàìè ÀÀÑ è ÀÝÌÑ. Áûëè îáíàðóæåíû êîððåëÿöèè

ìåæäó ñîäåðæàíèåì òîêñè÷íûõ ýëåìåíòîâ è èõ ñîäåðæàíèÿìè â ïî÷âå, âîäå è

ñíåæíîì ïîêðîâå (ã. Êàçàíü). Ðåçóëüòàòû èçìåðåíèé áûëè èñïîëüçîâàíû äëÿ ðàç-

ðàáîòêè ìåòîäè÷åñêèõ îñíîâ ìîíèòîðèíãà è äèàãíîñòèêè çàáîëåâàíèé íàñåëåíèÿ

ãîðîäà, ñâÿçàííûõ ñ ïîâûøåííûì ñîäåðæàíèåì òîêñè÷íûõ õèìè÷åñêèõ ýëåìåí-

òîâ â ÷åëîâå÷åñêîì îðãàíèçìå.

Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñëåäîâûõ êîíöåíòðàöèé òÿæåëûõ ìåòàëëîâ (õðîì, öèíê,

íèêåëü, æåëåçî è ìåäü) â ÷åëîâå÷åñêèõ âîëîñàõ ðàçðàáîòàíà ñòàíäàðòíàÿ (îôèöè-

àëüíàÿ) ðîññèéñêàÿ ìåòîäèêà, îñíîâàííàÿ íà ïðèìåíåíèè ÀÀÑ (Fe ïðè 248,3 íì;

Zn ïðè 213,9 íì; Ni ïðè 232,0 íì; Cu ïðè 324,4 íì è Cr ïðè 357,9 íì) [42].

Ïðîáû âîëîñ ñðåçàëè ñ çàòûëî÷íîé ÷àñòè ãîëîâû, ãäå èõ ðîñò íàèáîëåå èíòåí-

ñèâåí. Âîëîñû ñðåçàþò îò êîðíåé äëèíîé íå áîëåå 3 ñì. Îïòèìàëüíàÿ íàâåñêà

âîëîñ äëÿ àíàëèçà 150–200 ìã. Âîëîñû óêëàäûâàþò â ìàðêèðîâàííûå áóìàæíûå

ïàêåòû. Ïðîáû âûäåðæèâàþò äëèòåëüíîå õðàíåíèå.

Èçìåðåíèå êîíöåíòðàöèè ìåòàëëîâ â âîëîñàõ ïðîèçâîäèòñÿ ïîñëå ïîäãîòîâêè

ïðîáû ê àíàëèçó. Îòîáðàííûå îáðàçöû âîëîñ âûäåðæèâàþò â ñìåñè ýòàíîëà è äèý-

òèëîâîãî ýôèðà (1:1) ñ öåëüþ î÷èñòêè è ïðîìûâêè, à çàòåì âûñóøèâàþò ïðè òåì-

ïåðàòóðå 80°Ñ. Î÷èùåííûå îáðàçöû õðàíÿò â ýêñèêàòîðå. Íàâåñêè âîëîñ ïîìåùà-

þò â ìàðêèðîâàííûå ïðîáèðêè è ïðèëèâàþò ñìåñü àçîòíîé êèñëîòû è ïåðåêèñè

âîäîðîäà (3:1). Ïðîáû ðàñòâîðÿþò â òå÷åíèå ñóòîê. Ïðîâîäÿò çàìåð îáúåìà ïðîáû

ïîñëå ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ âîëîñ.

Ðåçóëüòàòû èçìåðåíèé êîíöåíòðàöèè ìåòàëëîâ ðåãèñòðèðóþò ïî ïîêàçàíèÿì

ïðèáîðà ñ öèôðîâîé èíäèêàöèåé, îòêàëèáðîâàííîãî ïî êîíöåíòðàöèÿì ðàáî÷èõ

ñòàíäàðòíûõ ðàñòâîðîâ îïðåäåëÿåìûõ ìåòàëëîâ, çà âû÷åòîì çíà÷åíèÿ ôîíîâîé

êîíöåíòðàöèè. Ãðàäóèðîâî÷íàÿ õàðàêòåðèñòèêà âûðàæàåò çàâèñèìîñòü âåëè÷èíû

àáñîðáöèè îò êîíöåíòðàöèè (ìêã) è ñòðîèòñÿ ïî 4 ñåðèÿì ñòàíäàðòíûõ ðàñòâîðîâ

(ñì., íàïðèìåð, òàáë. IV.2). Ðàñòâîðû ãîòîâÿò íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä èñïîëüçîâà-

íèåì ïóòåì ðàçâåäåíèÿ îñíîâíîãî ñòàíäàðòíîãî ðàñòâîðà (ñì. ðàçäåë 1.1).

Èíòåðâàë îïðåäåëÿåìûõ ñîäåðæàíèé 2,5–15 ìêã/ã (æåëåçî); 50–150 ìêã/ã

(öèíê); 1–5 ìêã/ã (íèêåëü); 1–5 ìêã/ã (ìåäü) è 1–6 ìêã/ã (õðîì). Ñóììàðíàÿ

ïîãðåøíîñòü íå áîëåå 25% (Ð = 0,95). Âðåìÿ àíàëèçà 7–10 ìèí.

Ñïåêòðàëüíàÿ ìåòîäèêà (ÀÝÌÑ/ÈÑÏ) èñïîëüçîâàëàñü äëÿ îïðåäåëåíèÿ â

âîëîñàõ ÷åëîâåêà ãèäðèäîîáðàçóþùèõ è íåãèäðèäîîáðàçóþùèõ ýëåìåíòîâ (Sn,

Hg, Pb, As, Cd, Ni, Cr è äð.) [28]. Ëåòó÷èå ãèäðèäû ñèíòåçèðîâàëè â ðåàêòîðå ñ

NaBH

4

. Íà êîíå÷íûé ðåçóëüòàò âëèÿåò êîíöåíòðàöèÿ HCl, ñêîðîñòü ãàçà-íîñèòå-

ëÿ, òåìïåðàòóðà è êîíöåíòðàöèÿ îáðàçóþùèõñÿ ãèäðèäîâ.

Ïðè îïðåäåëåíèè â âîëîñàõ îðãàíè÷åñêèõ âåùåñòâ ìîæíî îáîéòèñü è áåç

ïðåäâàðèòåëüíîé îáðàáîòêè ïðîáû (ýêñòðàêöèÿ, î÷èñòêà ýêñòðàêòà, êîíöåíòðè-

ðîâàíèå è ïð.). Ôèðìà Âàðèàí (ÑØÀ) ðàçðàáîòàëà ñèñòåìó ââîäà òâåðäûõ îáðàç-

öîâ äëÿ ãàçîâîãî õðîìàòîãðàôà ñåðèè 3000 [63]. Ýòà ñèñòåìà ðèñ. IV.8 ÿâëÿåòñÿ

Âîëîñû 651

ìîäèôèêàöèåé êàïèëëÿðíîãî èíæåêòîðà 1079 ýòîãî õðîìàòîãðàôà. Ïðîáà (âîëî-

ñû, ïî÷âà, äîííûå îñàäêè è äð.) ïîìåùàåòñÿ â êâàðöåâóþ ìèêðîâèàëó (1) è èñïà-

ðÿåòñÿ â èíæåêòîðå ñ èñïîëüçîâàíèåì øòàòíîé ñèñòåìû íàãðåâà. Èñïàðåííûé

îáðàçåö ÷åðåç äåàêòèâèðîâàííûé øèðîêèé êâàðöåâûé êàïèëëÿð (2) ïîñòóïàåò â

àíàëèçàòîð (õðîìàòîãðàô, õðîìàòî-ìàññ-ñïåêòðîìåòð èëè ìàññ-ñïåêòðîìåòð).

Ñî÷åòàíèå âûñîêîé ñåëåêòèâíîñòè ìàññ-ñïåêòðîìåòðà Ñàòóðí (ôèðìà Âàðè-

àí) â ðåæèìå òàíäåìíîé ìàññ-ñïåêòðîìåòðèè ñ òàêèì ñïîñîáîì ââîäà ïðîáû

ïîçâîëÿåò ëåãêî îïðåäåëÿòü öåëåâûå àíàëèòû â ñëîæíûõ ìàòðèöàõ. Òèïîâû-

ìè ïðèìåðàìè àíàëèçà ìîæåò ñëóæèòü îïðåäåëåíèå â âîëîñàõ íàðêîòè÷åñêèõ

âåùåñòâ (õðîìàòîãðàììà íà ðèñ. IV.9) èëè îñòàòî÷íûõ êîëè÷åñòâ ïåñòèöèäîâ èëè

ÏÀÓ â çàãðÿçíåííûõ ïî÷âàõ è äîííûõ îòëîæåíèÿõ.

Íàðêîòèêè îïðåäåëÿëè ïðè ïðÿìîì ââîäå îáðàçöà âîëîñ â ãàçîâûé õðîìàòîã-

652 Ãëàâà IV. Áèîñðåä

Ðèñ. IV.8. Êàïèëëÿðíûé èíæåêòîð (èñïàðèòåëü) 1079

ãàçîâîãî õðîìàòîãðàôà Âàðèàí 3000 ñ óñòðîéñòâîì äëÿ

ïðÿìîãî ââîäà òâåðäûõ îáðàçöîâ [63]: 1 — ìèêðîâèàëà;

2 — øèðîêèé êâàðöåâûé êàïèëëÿð.

1

2

Ðèñ. IV.9. Õðîìàòîãðàììà èñêóññòâåííîé

ñìåñè íàðêîòèêîâ, âûäåëåííûõ èç âîëîñ

[45]. Êîëè÷åñòâî êàæäîãî êîìïîíåíòà 12

íã. Ïîÿñíåíèÿ â òåêòñòå.

ðàô (ñì. âûøå). Àíàëèçèðóåìûå ñîåäèíåíèÿ ðàçäåëÿëè íà êàïèëëÿðíîé êîëîíêå

èç ïëàâëåííîãî êâàðöà (10 ì × 0,53 ìì) ñ ÍÐ-1 (ïîïåðå÷íîñøèòûé ìåòèëñèëèêîí,

ïëåíêà 2,65 ìêì) ïðè ïðîãðàììèðîâàíèè òåìïåðàòóðû ñ ÒÈÄ (ãàç-íîñèòåëü ãåëèé,

20 ìë/ìèí). Â ýòèõ óñëîâèÿõ ïîëó÷åíî õîðîøåå ðàçäåëåíèå (ðèñ. IV.9) ñåìè îñíîâ-

íûõ êîìïîíåíòîâ èñêóññòâåííîé ñìåñè íàðêîòèêîâ.

3. Âûäûõàåìûé âîçäóõ

Áûñòðîå ãàçîõðîìàòîãðàôè÷åñêîå îïðåäåëåíèå ýòàíîëà â âûäûõàåìîì âîçäóõå

[22] ïðåäóñìàòðèâàåò èñïîëüçîâàíèå óñòðîéñòâà, ñ ïîìîùüþ êîòîðîãî àíàëèçèðó-

åìûå ãàçû è ïàðû âûäóâàþòñÿ íåïîñðåäñòâåííî â ôîòîèîíèçàöèîííûé äåòåêòîð,

ðåãèñòðèðóþùèé êîíöåíòðàöèþ ýòàíîëà íà óðîâíå ~0,5 ppm. Ìåòîä ñåëåêòèâåí

ïî îòíîøåíèþ ê óêñóñíîé êèñëîòå, èçîñïèðòàì è ãîìîëîãàì ýòàíîëà (ñì. òàêæå

ãëàâó I).

Âñåãî 4 ìèí òðåáóåòñÿ äëÿ ãàçîõðîìàòîãðàôè÷åñêîãî îïðåäåëåíèÿ îñíîâíûõ

êîìïîíåíòîâ âûäûõàåìîãî âîçäóõà (ïåíòàí, ýòàíîë, àöåòîí è èçîïðåí) ïîñëå

èçâëå÷åíèÿ ýòèõ ËÎÑ è èõ êîíöåíòðèðîâàíèÿ â øïðèöå äëÿ ÒÔÌÝ (ñì. ãëàâó I

è ðàçäåë 2.4 â ãëàâå II) [23, 64].

Äëÿ èçâëå÷åíèÿ ËÎÑ èç âîçäóõà ñ ïîìîùüþ ÒÔÌÝ áûëè èçó÷åíû ÷åòûðå òèïà

êâàðöåâîãî âîëîêíà, èìïðåãíèðîâàííîãî ïîëèìåðíîé æèäêîñòüþ [64]: ïîëèäèìå-

òèëñèëîêñàí (ïëåíêà 100 ìêì), ïîëèàêðèëàò (85 ìêì), ïîëèäèìåòèëñèëîêñàí/äèâè-

íèëáåíçîë (65 ìêì) è Êàðáîâàêñ/äèâèíèëáåíçîë (65 ìêì). Áîëüøåé ÷óâñòâèòåëü-

íîñòè óäàëîñü äîáèòüñÿ ïðè èñïîëüçîâàíèè âîëîêíà, èìïðåãíèðîâàííîãî ñìåñüþ

ïîëèäèìåòèëñèëîêñàíà ñ äèâèíèëáåçîëîì. Õðîìàòîãðàôèðîâàíèå êîìïîíåíòîâ

âûäûõàåìîãî âîçäóõà ïðîâîäèëîñü íà êàïèëëÿðíîé êîëîíêå (30 ì × 0,25 ìì) ñ

ñèëèêîíîì SP-Sil-19 CB ïðè ïðîãðàììèðîâàíèè òåìïåðàòóðû (30–150°Ñ) ñ ÏÈÄ

[23]. Ïðîäîëæèòåëüíîñòü èçâëå÷åíèÿ ËÎÑ èç âîçäóõà ìåòîäîì ÒÔÌÝ ñîñòàâëÿåò 1

ìèí, à âðåìÿ äåñîðáöèè èõ â èñïàðèòåëå õðîìàòîãðàôà 15 ñ. Ïðåäåë îïðåäåëåíèÿ äëÿ

ýòàíîëà, àöåòîíà è èçîïðåíà 5,8; 1,8 è 0,3 íìîëü/ë ñîîòâåòñòâåííî ïðè òåìïåðàòóðå

35°Ñ è îòíîñèòåëüíîé âëàæíîñòè âîçäóõà 98%. Îòíîñèòåëüíîå ñòàíäàðòíîå îòêëîíå-

íèå 0,02–0,06 [64].

Ïîìèìî ËÎÑ â âûäûõàåìîì ÷åëîâåêîì âîçäóõå ìîãóò ïðèñóòñòâîâàòü è ÷ðåç-

âû÷àéíî òîêñè÷íûå ÌÎÑ, â ÷àñòíîñòè, îðãàíè÷åñêèå ñîåäèíåíèÿ ðòóòè è ñåëåíà,

êîòîðûå ìîæíî íàäåæíî îïðåäåëèòü ìåòîäîì ÃÕ/ÌÑ íà óðîâíå íã/ì

3

[72]. Òàêî-

ãî ðîäà àíàëèçû, îñîáåííî îïðåäåëåíèå ýòàíîëà

*

, àêòóàëüíû â èíäóñòðèàëüíîé

è êîììóíàëüíîé ãèãèåíå (ñàíèòàðíî-õèìè÷åñêèé àíàëèç), ïðè èññëåäîâàíèè

êà÷åñòâà âîçäóõà â ãåðìåòè÷íî-èçîëèðîâàííûõ ïîìåùåíèÿõ, â òîêñèêîëîãèè è

ñóäåáíî-ìåäèöèíñêèõ èññëåäîâàíèÿõ.

Âíóòðè ñàìîëåòîâ èäåíòèôèêàöèÿ è îïðåäåëåíèå ËÎÑ âûïîëíÿåòñÿ ÷àùå âñå-

ãî ïî òðàäèöèîííîé ìåòîäèêå [65]. Âîçäóõ (5 ë) ïðîïóñêàþò ÷åðåç ñîðáöèîííóþ

òðóáêó (ñì. ðàçäåë 4 â ãëàâå I) è ïîñëå òåðìîäåñîðáöèè è êðèîôîêóñèðîâàíèÿ åãî

êîìïîíåíòû àíàëèçèðóþò íà ãàçîâîì õðîìàòîãðàôå èëè õðîìàòî-ìàññ-ñïåêòðî-

Âûäûõàåìûé âîçäóõ 653

* Ïî èíèöèàòèâå ÃÈÁÄÄ ñ îñåíè 2001 ã. â áàðàõ è ðåñòîðàíàõ Ìîñêâû íà÷àëè óñòàíàâëèâàòü àâòî-

ìàòè÷åñê å àíàëèçàòîðû, ïîçâîëÿþùèå êàæäîìó ïîñåòèòåëþ îïðåäåëèòü óðîâåíü àëêîãîëÿ â âûäûõàå-

ìîì âîçäóõå (è ðåøèòü — ñàäèòüñÿ åìó çà ðóëü èëè íåò).

Другов Ю.С., Родин А.А. Пробоподготовка в экологическом анализе

Подождите немного. Документ загружается.