Другов Ю.С., Родин А.А. Пробоподготовка в экологическом анализе

æàíèå ñïèðòîâ â èñõîäíîé ñòàíäàðòíîé ñìåñè ñîñòàâëÿåò (ñ ó÷åòîì ïëîòíîñòè è

ñîäåðæàíèÿ îñíîâíîãî âåùåñòâà):

ìåòàíîë 7,97 ìêã/ñì

3

;

ýòàíîë 7,89 ìêã/ñì

3

;

èçîïðîïàíîë 7,85 ìêã/ñì

3

;

ïðîïàíîë 8,04 ìêã/ñì

3

;

èçîáóòàíîë 8,03 ìêã/ñì

3

;

áóòàíîë 8,10 ìêã/ñì

3

.

Ñðîê õðàíåíèÿ èñõîäíîãî ñòàíäàðòíîãî ðàñòâîðà â õîëîäíîì ìåñòå — íå áîëåå

2 ñóòîê.

Óñòàíîâëåíèå ãðàäóèðîâî÷íîé õàðàêòåðèñòèêè

Ãðàäóèðîâî÷íóþ õàðàêòåðèñòèêó óñòàíàâëèâàþò ìåòîäîì àáñîëþòíîé ãðàäóè-

ðîâêè íà ãðàäóèðîâî÷íûõ ñìåñÿõ ñïèðòîâ. Îíà âûðàæàåò çàâèñèìîñòü ïëîùàäè

ïèêà íà õðîìàòîãðàììå (ìì

2

) îò êîíöåíòðàöèè ñîîòâåòñòâóþùåãî ñïèðòà â êðîâè

(ìêã/ñì

3

) è ñòðîèòñÿ ïî 5 ñåðèÿì ñòàíäàðòíûõ ðàñòâîðîâ äëÿ ãðàäóèðîâêè. Êàæ-

äóþ ñåðèþ, ñîñòîÿùóþ èç 5 ðàáî÷èõ ñòàíäàðòíûõ ðàñòâîðîâ, ãîòîâÿò â ãåðìåòè÷-

íî çàêðûâàþùèõñÿ ñòåêëÿííûõ ñîñóäàõ. Äëÿ ýòîãî â êàæäûé ñîñóä âíîñÿò 2 ñì

3

öåëüíîé êðîâè, íå ñîäåðæàùåé ñïèðòû, è äîáàâëÿþò èñõîäíûé ðàñòâîð â ñîîòâåò-

ñòâèè ñ òàáëèöåé IV.10. Ñðîê õðàíåíèÿ ðàñòâîðîâ — 8 ÷.

Òàáëèöà IV.10. Ñòàíäàðòíûå ñìåñè äëÿ óñòàíîâëåíèÿ ãðàäóèðîâî÷íîé õàðàêòåðèñòèêè ïðè îïðåäåëå-

íèè êîíöåíòðàöèè ìåòàíîëà, ýòàíîëà, èçîïðîïàíîëà, ïðîïàíîëà, èçîáóòàíîëà è áóòàíîëà â êðîâè

(ôðàãìåíò øêàëû) [42]

Íîìåð ñìåñè äëÿ ãðàäóèðîâêè 1 2 3 4 5

Îáúåì èñõîäíîãî ñòàíäàðòíîãî

ðàñòâîðà, ñì

3

5 25 50 200 400

Ñîäåðæàíèå ìåòàíîëà, ìêã/ñì

3

0,02 0,099 0,198 0,790 1,585

Ñîäåðæàíèå ýòàíîëà, ìêã/ñì

3

0,019 0,098 0,197 0,790 1,578

Ñîäåðæàíèå èçîïðîïàíîëà, ìêã/ñì

3

0,019 0,098 0,196 0,785 1,570

Ñîäåðæàíèå ïðîïàíîëà, ìêã/ñì

3

0,020 0,100 0,201 0,804 1,608

Ñîäåðæàíèå èçîáóòàíîëà, ìêã/ñì

3

0,020 0,100 0,200 0,803 1,605

Ñîäåðæàíèå áóòàíîëà, ìêã/ñì

3

0,020 0,101 0,202 0,810 1,619

Ñîñóä çàêðûâàþò íàâèí÷èâàþùåéñÿ êðûøêîé ñ èíåðòíîé ïðîêëàäêîé è íàãðå-

âàþò íà âîäÿíîé áàíå ïðè òåìïåðàòóðå 95–96°Ñ â òå÷åíèå 10 ìèí. 5 ñì

3

ðàâíîâåñ-

íîé ïàðîâîé ôàçû ââîäÿò â êîëîíêó õðîìàòîãðàôà è àíàëèçèðóþò ïðè ñëåäóþùåì

ðåæèìå ðàáîòû ïðèáîðà:

íà÷àëüíàÿ òåìïåðàòóðà òåðìîñòàòà êîëîíîê 60°Ñ,

âðåìÿ òåðìîñòàòèðîâàíèÿ 250 ñåê;

ñêîðîñòü íàãðåâà òåðìîñòàòà êîëîíîê äî êîíå÷íîé

òåìïåðàòóðû 6°/ìèí;

êîíå÷íàÿ òåìïåðàòóðà òåðìîñòàòà êîëîíîê 110°Ñ,

âðåìÿ òåðìîñòàòèðîâàíèÿ 300 ñåê;

òåìïåðàòóðà äåòåêòîðà 130°Ñ;

684 Ãëàâà IV. Áèîñðåä

òåìïåðàòóðà èñïàðèòåëÿ 120°Ñ;

ñêîðîñòü ïîäà÷è ãàçîâ: ãàçà-íîñèòåëÿ (ãåëèÿ) 30 ñì

3

/ìèí,

âîäîðîäà 30 ñì

3

/ìèí,

âîçäóõà 300 ñì

3

/ìèí;

ñêîðîñòü ïðîòÿæêè ëåíòû ñàìîïèñöà 0,3 ìì/ìèí;

øêàëà èçìåðèòåëÿ òîêà 4 . 10

–10

À;

âðåìÿ óäåðæèâàíèÿ: ìåòàíîëà 3 ìèí 05 ñåê,

ýòàíîëà 5 ìèí 20 ñåê,

èçîïðîïàíîëà 7 ìèí 20 ñåê,

ïðîïàíîëà 9 ìèí 00 ñåê,

èçîáóòàíîëà 10 ìèí 30 ñåê,

áóòàíîëà 11 ìèí 35 ñåê.

Íà ïîëó÷åííîé õðîìàòîãðàììå îïðåäåëÿþò ïëîùàäè ïèêîâ ñîîòâåòñòâóþùèõ

ñïèðòîâ è ïî ñðåäíèì ðåçóëüòàòàì èç 5 ñåðèé ñòðîÿò ãðàäóèðîâî÷íóþ õàðàêòåðè-

ñòèêó. Ãðàäóèðîâêó ïðîâåðÿþò 1 ðàç â íåäåëþ è ïðè ñìåíå ïàðòèè ðåàêòèâîâ.

Îòáîð ïðîá

Äëÿ îòáîðà ïðîá èñïîëüçóþò ÷èñòóþ ïîñóäó ñ ïëîòíî çàêðûâàþùåéñÿ êðûøêîé.

Îòîáðàííóþ äëÿ àíàëèçà ïðîáó âåíîçíîé êðîâè â êîëè÷åñòâå 2 ñì

3

ñðàçó àíàëèçè-

ðóþò èëè õðàíÿò â õîëîäèëüíèêå íå áîëåå 24 ÷ ïðè òåìïåðàòóðå íå âûøå 4°Ñ.

Âûïîëíåíèå èçìåðåíèé

2 ñì

3

àíàëèçèðóåìîé êðîâè ïåðåíîñÿò â ñîñóä, çàêðûâàþò åãî èíåðòíîé ïðîêëàä-

êîé è íàâèí÷èâàþùåéñÿ êðûøêîé ñ îòâåðñòèåì â öåíòðå è íàãðåâàþò íà âîäÿíîé

áàíå ïðè òåìïåðàòóðå 95–96°Ñ â òå÷åíèå 10 ìèí. Çàòåì îòáèðàþò ïîäîãðåòûì ñòåê-

ëÿííûì øïðèöåì 5 ñì

3

ðàâíîâåñíîé ïàðîâîé ôàçû è ââîäÿò â êîëîíêó õðîìàòîã-

ðàôà ïðè âûøåóêàçàííîì ðåæèìå ðàáîòû ïðèáîðà.

Âû÷èñëåíèå ðåçóëüòàòîâ èçìåðåíèé

Ðàññ÷èòûâàþò ïëîùàäü ïèêà ñîîòâåòñòâóþùåãî ñïèðòà ïî ôîðìóëå:

S = h × L, ìì

2

,

ãäå h — âûñîòà ïèêà, ìì; L — øèðèíà ïèêà íà ïîëîâèíå âûñîòû, ìì.

Ïî ãðàäóèðîâî÷íîìó ãðàôèêó îïðåäåëÿþò êîíöåíòðàöèþ ñîîòâåòñòâóþùåãî

ñïèðòà â êðîâè (ìêã/ñì

3

).

5.2. Ãàçîõðîìàòîãðàôè÷åñêèé ìåòîä êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ

àðîìàòè÷åñêèõ (áåíçîë, òîëóîë, ýòèëáåíçîë, î-, ì-, ï-êñèëîë)

óãëåâîäîðîäîâ â áèîñðåäàõ (êðîâü) — ÌÓÊ 4.1.765-99 [42]

Ìåòîèäêà îáåñïå÷èâàåò îïðåäåëåíèå àðîìàòè÷åñêèõ óãëåâîäîðîäîâ â êðîâè â

äèàïàçîíå êîíöåíòðàöèé (ìêã/ñì

3

):

áåíçîë — 0,005 — 0,1

òîëóîë — 0,01 — 0,1

Ñòàíäàðòíûå ìåòîäèêè 685

ýòèëáåíçîë — 0,007 — 0,2

êñèëîëû — 0,014- 0,2

Îáùàÿ ïîãðåøíîñòü îïðåäåëåíèÿ:

áåíçîëà — 23,8%,

òîëóîëà — 14,4%,

ýòèëáåíçîëà — 18,0%,

ï-, ì-êñèëîëà — 16,8%,

î-êñèëîëà — 16,8%.

Ñóùíîñòü ìåòîäà

Ìåòîäèêà îñíîâàíà íà ïðåäâàðèòåëüíîì âûäåëåíèè àðîìàòè÷åñêèõ óãëåâîäîðî-

äîâ èç áèîëîãè÷åñêîãî ìàòåðèàëà ïóòåì íàãðåâàíèÿ îáúåêòà è ïîñëåäóþùåãî ãàçî-

õðîìàòîãðàôè÷åñêîãî àíàëèçà ïàðîãàçîâîé ôàçû.

Èçìåðåíèå êîíöåíòðàöèè àðîìàòè÷åñêèõ óãëåâîäîðîäîâ âûïîëíÿþò ìåòîäîì

ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè ñ ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûì äåòåêòèðîâàíèåì.

Îïðåäåëåíèþ íå ìåøàþò àöåòîí, ýòàíîë è äðóãèå ñïèðòû.

Äëèòåëüíîñòü àíàëèçà — 15 ìèí.

Ñðåäñòâà èçìåðåíèé, âñïîìîãàòåëüíûå óñòðîéñòâà, ðåàêòèâû

Ïðè âûïîëíåíèè îïðåäåëåíèÿ ïðèìåíÿþò ñëåäóþùèå ñðåäñòâà èçìåðåíèé, âñïî-

ìîãàòåëüíûå óñòðîéñòâà, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû. Äîïóñêàåòñÿ ïðèìåíåíèå äðóãèõ

òèïîâ ñðåäñòâ èçìåðåíèé, âñïîìîãàòåëüíîãî îáîðóäîâàíèÿ è õèìðåàêòèâîâ ñ àíà-

ëîãè÷íûìè ìåòðîëîãè÷åñêèìè õàðàêòåðèñòèêàìè.

Ñðåäñòâà èçìåðåíèé

Õðîìàòîãðàô ãàçîâûé ñ ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûì äåòåêòîðîì

Âåñû ëàáîðàòîðíûå ÂËÐ-200 àíàëèòè÷åñêèå ÃÎÑÒ 24104-80Å

Ñåêóíäîìåð «Àãàò» ÃÎÑÒ 5072-79Å

Ìèêðîøïðèöû ÌØ-10 ÒÓ 5Å2.833.106

Øïðèöû ìåäèöèíñêèå ñòåêëÿííûå âìåñòèìîñòüþ 5 ñì

3

ÒÓ 64-1-378-83

Êîëáû ìåðíûå âìåñòèìîñòüþ 1000 ñì

3

ÃÎÑÒ 1770-74Å

Ïèïåòêè âìåñòèìîñòüþ 1, 5, 10 ñì

3

ÃÎÑÒ 20292-74

Ïðîáèðêè ñ ïðèòåðòûìè ïðîáêàìè âìåñòèìîñòüþ 10 ñì

3

ÃÎÑÒ 1770-74Å

Âñïîìîãàòåëüíûå óñòðîéñòâà

Õðîìàòîãðàôè÷åñêàÿ êîëîíêà ñòàëüíàÿ äëèíîé 3 ì âíóòðåííèì äèàìåòðîì

3 ìì

Áèäèñòèëëÿòîð ÃÎÑÒ 15150-69

Ðåäóêòîð êèñëîðîäíûé ÒÓ 26-05-235-70

Ìàòåðèàëû

Ãåëèé â áàëëîíå ÒÓ 51-940-80

Âîäîðîä òåõíè÷åñêèé ÃÎÑÒ 3022-80

Âîçäóõ â áàëëîíå ÃÎÑÒ 11882-73

686 Ãëàâà IV. Áèîñðåä

Ðåàêòèâû

Apiezon L íà õðîìàòîíå N-ñóïåð ôðàêöèè 0,16-0,20 ìì — íåïîäâèæíàÿ ôàçà äëÿ

çàïîëíåíèÿ õðîìàòîãðàôè÷åñêîé êîëîíêè

Áåíçîë õ.÷. ÒÓ 6-09-787-76

Òîëóîë õ.÷. ÒÓ 6-09-787-76

Ýòèëáåíçîë õ.÷. ÒÓ 6-09-787-76

Ï-, ì-êñèëîë õ.÷. ÒÓ 6-09-915-76

Î-êñèëîë ÃÑÎ 2913-84

Ùàâåëåâàÿ êèñëîòà ÷. ÃÎÑÒ 22180-76

Âîäà äèñòèëëèðîâàííàÿ ÃÎÑÒ 6709-72

Ïîäãîòîâêà ê âûïîëíåíèþ èçìåðåíèé

Ïåðåä âûïîëíåíèåì èçìåðåíèé ïðîâîäÿò ñëåäóþùèå ðàáîòû: ïîäãîòîâêà õðîìà-

òîãðàôè÷åñêîé êîëîíêè, ïðèãîòîâëåíèå ñòàíäàðòíûõ ñìåñåé, óñòàíîâëåíèå ãðàäó-

èðîâî÷íîé õàðàêòåðèñòèêè.

Ïðèãîòîâëåíèå ñòàíäàðòíûõ ñìåñåé

Äëÿ ïîñòðîåíèÿ ãðàäóèðîâî÷íîãî ãðàôèêà ñîáèðàþò êðîâü, íå ñîäåðæàùóþ èññëå-

äóåìûõ êîìïîíåíòîâ è ãîòîâÿò ñåðèþ ðàáî÷èõ ñòàíäàðòíûõ ðàñòâîðîâ.

Èñõîäíûé ñòàíäàðòíûé ðàñòâîð äëÿ ãðàäóèðîâêè: â êîëáó íà 1000 ñì

2

ñ äèñ-

òèëëèðîâàííîé âîäîé ââîäÿò ìèêðîøïðèöåì ïî 10 ìì

3

áåíçîëà, òîëóîëà, ýòèë-

áåíçîëà, ïî 15 ìì

3

ï-, ì-êñèëîëà è î-êñèëîëà. Âåñîâîå ñîäåðæàíèå êîìïîíåíòîâ

â èñõîäíîé ñòàíäàðòíîé ñìåñè ñîñòàâëÿåò (ñ ó÷åòîì ïëîòíîñòè è ñîäåðæàíèÿ

îñíîâíîãî âåùåñòâà) áåíçîë — 8,79 ìêã/ñì

3

, òîëóîë — 8,66 ìêã/ñì

3

, ýòèëáåíçîë

— 8,67 ìêã/ñì

3

, ï-, ì-êñèëîë — 13,20 ìêã/ñì

3

, î-êñèëîë — 13,20 ìêã/ñì

3

. Ñðîê

õðàíåíèÿ — 3 ÷.

Ïîäãîòîâêà õðîìàòîãðàôè÷åñêîé êîëîíêè

Õðîìàòîãðàôè÷åñêóþ êîëîíêó ïåðåä çàïîëíåíèåì íåïîäâèæíîé ôàçîé ïðîìû-

âàþò äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé, àöåòîíîì, ãåêñàíîì, âûñóøèâàþò â òîêå èíåð-

òíîãî ãàçà. Çàïîëíåíèå õðîìàòîãðàôè÷åñêîé êîëîíêè íàñàäêîé ïðîâîäÿò ïîä

âàêóóìîì. Êîíöû êîëîíêè çàêðûâàþò ñòåêëîâàòîé è, íå ïîäêëþ÷àÿ ê äåòåêòîðó,

êîíäèöèîíèðóþò â òîêå ãàçà-íîñèòåëÿ (ãåëèÿ) ñ ðàñõîäîì 30 ñì

3

/ìèí ïðè òåìïå-

ðàòóðå 200°Ñ â òå÷åíèå 18 ÷. Ïîñëå îõëàæäåíèÿ êîëîíêó ïîäêëþ÷àþò ê äåòåêòîðó,

çàïèñûâàþò íóëåâóþ ëèíèþ â ðàáî÷åì ðåæèìå. Ïðè îòñóòñòâèè ìåøàþùèõ âëèÿ-

íèé êîëîíêà ãîòîâà ê ðàáîòå.

Óñòàíîâëåíèå ãðàäóèðîâî÷íîé õàðàêòåðèñòèêè

Ãðàäóèðîâî÷íóþ õàðàêòåðèñòèêó óñòàíàâëèâàþò ìåòîäîì àáñîëþòíîé ãðàäóè-

ðîâêè íà ãðàäóèðîâî÷íûõ ñìåñÿõ àðîìàòè÷åñêèõ óãëåâîäîðîäîâ. Îíà âûðàæàåò

çàâèñèìîñòü ïëîùàäè ïèêà íà õðîìàòîãðàììå (ìì

2

) îò ìàññû êîìïîíåíòà (ìêã)

è ñòðîèòñÿ ïî 4 ñåðèÿì ñòàíäàðòíûõ ðàñòâîðîâ äëÿ ãðàäóèðîâêè. Êàæäóþ ñåðèþ,

ñîñòîÿùóþ èç 5 ñòàíäàðòíûõ ðàñòâîðîâ, ãîòîâÿò â ìåðíûõ ïðîáèðêàõ îáúåìîì 10

ñì

3

. Äëÿ ýòîãî â êàæäóþ ïðîáèðêó âíîñÿò ïî 5 ñì

3

êðîâè è äîáàâëÿþò èñõîäíóþ

ñòàíäàðòíóþ ñìåñü äëÿ ãðàäóèðîâêè â ñîîòâåòñòâèè ñ òàáëèöåé IV.11. Ñðîê õðàíå-

Ñòàíäàðòíûå ìåòîäèêè 687

íèÿ — 3 ÷.

Â õðîìàòîãðàôè÷åñêóþ êîëîíêó ÷åðåç èñïàðèòåëü ââîäÿò ïî 5 ñì

3

ïàðîãàçîâîé

ïðîáû êàæäîãî ãðàäóèðîâî÷íîãî ðàñòâîðà è àíàëèçèðóþò â óñëîâèÿõ:

òåìïåðàòóðà òåðìîñòàòà êîëîíîê 95°Ñ;

òåìïåðàòóðà èñïàðèòåëÿ 150°Ñ;

òåìïåðàòóðà äåòåêòîðà 100°Ñ;

ðàñõîä ãàçà-íîñèòåëÿ (ãåëèÿ) 30 ñì

3

/ìèí;

ðàñõîä âîäîðîäà 30 ñì

3

/ìèí;

ðàñõîä âîçäóõà 300 ñì

3

/ìèí;

øêàëà èçìåðèòåëÿ òîêà 10 × 10

–12

À;

ñêîðîñòü äèàãðàììíîé ëåíòû 240 ìì/÷;

âðåìÿ óäåðæèâàíèÿ áåíçîëà 2 ìèí 10 ñ;

òîëóîëà 3 ìèí 45 ñ;

ýòèëáåíçîëà 7 ìèí 00 ñ;

ï-, ì-êñèëîëà 7 ìèí 50 ñ;

î-êñèëîëà 8 ìèí 30 ñ.

Íà ïîëó÷åííîé õðîìàòîãðàììå îïðåäåëÿþò ïëîùàäè ïèêîâ îïðåäåëÿåìûõ êîì-

ïîíåíòîâ è ïî ñðåäíèì ðåçóëüòàòàì èç 5 ñåðèé ñòðîÿò ãðàäóèðîâî÷íóþ õàðàêòåðèñòè-

êó. Ãðàäóèðîâêó ïðîâåðÿþò 1 ðàç â íåäåëþ è ïðè ñìåíå ïàðòèè ðåàêòèâîâ.

Òàáëèöà IV.11. Ñòàíäàðòíûå ñìåñè äëÿ óñòàíîâëåíèÿ ãðàäóèðîâî÷íîé õàðàêòåðèñòèêè ïðè îïðåäåëå-

íèè êîíöåíòðàöèè àðîìàòè÷åñêèõ óãëåâîäîðîäîâ (ôðàãìåíò øêàëû) [42]

Íîìåð ñìåñè äëÿ ãðàäóèðîâêè 1 2 3 4 5

ÁÅÍÇÎË

Îáúåì èñõîäíîé ñòàíäàðòíîé ñìåñè

(8,79 ìêã/ñì

3

) ìì

3

5 10 15 20 25

Ñîäåðæàíèå áåíçîëà â 5 ñì

3

êðîâè,

ìêã/ñì

3

0,0087 0,0180 0,0270 0,0350 0,0440

ÒÎËÓÎË

Îáúåì èñõîäíîé ñòàíäàðòíîé ñìåñè

(8,66 ìêã/ñì

3

), ìì

3

5 10 15 20 25

Ñîäåðæàíèå ãîëóîëà â 5 ñì

3

êðîâè,

ìêã/ñì

3

0,0087 0,0170 0,0260 0,0350 0,0440

ÝÒÈËÁÅÍÇÎË

Îáúåì èñõîäíîé ñòàíäàðòíîé ñìåñè

(8,67 ìêã/ñì

3

), ìì

3

5 10 15 20 25

Ñîäåðæàíèå ýòèëáåíçîëà â 5 ñì

3

êðîâè, ìêã/ñì

3

0,0087 0,0170 0,0260 0,0350 0,0440

Ï-, Ì-ÊÑÈËÎË

Îáúåì èñõîäíîé ñòàíäàðòíîé ñìåñè

(13,2 ìêã/ñì

3

), ìì

3

5 10 15 20 25

Ñîäåðæàíèå ï-, ì-êèñëîëà â 5 ñì

3

êðîâè,

ìêã/ñì

3

0,0130 0,0260 0,0400 0,0530 0,0700

Î-ÊÑÈËÎË

Îáúåì èñõîäíîé ñòàíäàðòíîé ñìåñè

(13,2 ìêã/ñì

3

), ìì

3

5 10 15 20 25

Ñîäåðæàíèå î-êñèëîëà â 5 ñì

3

êðîâè,

ìêã/ñì

3

0,0130 0,0260 0,0400 0,0530 0,0700

688 Ãëàâà IV. Áèîñðåä

Îòáîð ïðîá

Îòáîð âåíîçíîé êðîâè â îáúåìå 10 ñì

3

ïðîèçâîäèòñÿ â òùàòåëüíî âûìûòóþ ñòåê-

ëÿííóþ ïðîáèðêó ñ ïðèòåðòîé ïðîáêîé. Àíàëèç êðîâè ïðîâîäèòü ñðàçó èëè õðà-

íèòü â õîëîäèëüíèêå íå áîëåå 5 ñóòîê.

Âûïîëíåíèå èçìåðåíèé

Âî ôëàêîí èç-ïîä ïåíèöèëëèíà ïîìåùàþò 5 ñì

3

èññëåäóåìîé áèîïðîáû, ïîäêèñ-

ëÿþò 10%-íûì ðàñòâîðîì ùàâåëåâîé êèñëîòû. Ôëàêîí çàêðûâàþò ðåçèíîâîé

ïðîáêîé è ñòàâÿò â ìåòàëëè÷åñêèé öèëèíäð ñ ïðîñâåðëåííûìè â ñòåíêàõ îòâåð-

ñòèÿìè è íàâèí÷èâàþùåéñÿ êðûøêîé. Öèëèíäð ñ ôëàêîíîì ïîãðóæàþò íà 2/3

âûñîòû â êèïÿùóþ âîäÿíóþ áàíþ. Ïî èñòå÷åíèè 5 ìèí îòáèðàþò øïðèöåì èç

ôëàêîíà 5 ñì

3

ïàðîãàçîâîé ôàçû è ââîäÿò åå â êîëîíêó õðîìàòîãðàôà. Íà õðîìà-

òîãðàììå ðàññ÷èòûâàþò ïëîùàäü ïèêà è ïî ãðàäóèðîâî÷íîé õàðàêòåðèñòèêå îïðå-

äåëÿþò êîíöåíòðàöèþ àðîìàòè÷åñêèõ óãëåâîäîðîäîâ â áèîïðîáå.

Âû÷èñëåíèå ðåçóëüòàòîâ èçìåðåíèé

Íà õðîìàòîãðàììå ðàññ÷èòûâàþò ïëîùàäü ïèêà è ïî ãðàäóèðîâî÷íîé õàðàêòåðè-

ñòèêå îïðåäåëÿþò êîíöåíòðàöèþ áåíçîëà, òîëóîëà, ýòèëáåíçîëà, ï-, ì-êñèëîëà,

î-êñèëîëà â áèîïðîáå.

Ðåçóëüòàò èçìåðåíèÿ ñîäåðæàíèÿ êîìïîíåíòà â áèîïðîáå îïðåäåëÿåòñÿ ïóòåì

òðåõêðàòíîãî çàìåðà ñ ó÷åòîì ñðåäíåãî êâàäðàòè÷íîãî îòêëîíåíèÿ. Ðåçóëüòàò àíà-

ëèçà ïðåäñòàâëÿþò â âèäå:

X

ñð

± 0,165 · Õ

ñð

,

ãäå Õ

ñð

— ñðåäíåå çíà÷åíèå çàìåðåííûõ êîíöåíòðàöèé, ìêã/ñì

3

.

5.3. Ãàçîõðîìàòîãðàôè÷åñêèé ìåòîä êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ

àðîìàòè÷åñêèõ àìèíîñîåäèíåíèé (àíèëèí, N-ìåòèëàíèëèí, î-òîëóèäèí,

N,N-äèìåòèëàíèëèí, N-ýòèëàíèëèí, N,N-äèýòèëàíèëèí) â áèîñðåäàõ

(ìî÷à) ÌÓÊ 4.1.766-99

Ìåòîäèêà îáåñïå÷èâàåò îïðåäåëåíèå àðîìàòè÷åñêèõ àìèíîñîåäèíåíèé â ìî÷å â

äèàïàçîíå êîíöåíòðàöèé:

àíèëèí 0,045–2,0 ìêã/ñì

3

N-ìåòèëàíèëèí 0,060–3,2 ìêã/ñì

3

î-òîëóèäèí 0,040–4,2 ìêã/ñì

3

N,N-äèìåòèëàíèëèí 0,050–5,2 ìêã/ñì

3

N-ýòèëàíèëèí 0,045–3,0 ìêã/ñì

3

N,N-äèýòèëàíèëèí 0,150–5,2 ìêã/ñì

3

Îñîáåííîñòüþ òîêñè÷åñêîãî äåéñòâèÿ àðîìàòè÷åñêèõ àìèíîñîåäèíåíèé ÿâëÿ-

þòñÿ ôóíêöèîíàëüíûå íàðóøåíèÿ öåíòðàëüíîé íåðâíîé ñèñòåìû, ïå÷åíè. Àðîìà-

òè÷åñêèå àìèíîñîåäèíåíèÿ âûçûâàþò äåðìàòèòû, ýêçåìû è ðàçâèòèå àëëåðãèè.

Ìåòîäèêà îñíîâàíà íà ïðåäâàðèòåëüíîì êîíöåíòðèðîâàíèè àíàëèçèðóåìûõ

ñîåäèíåíèé èç áèîëîãè÷åñêîãî ìàòåðèàëà ýêñòðàêöèåé õëîðîôîðìîì è ïîñëåäóþ-

Ñòàíäàðòíûå ìåòîäèêè 689

ùåãî ãàçîõðîìàòîãðàôè÷åñêîãî àíàëèçà õëîðîôîðìåííîãî ýêñòðàêòà.

Èçìåðåíèå êîíöåíòðàöèè àðîìàòè÷åñêèõ àìèíîñîåäèíåíèé âûïîëíÿþò ìåòî-

äîì ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè ñ ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûì äåòåêòèðîâàíèåì.

Íèæíèé ïðåäåë èçìåðåíèÿ â îáúåìå ïðîáû:

àíèëèí 0,045 ìêã,

N-ìåòèëàíèëèí 0,060 ìêã,

î-òîëóèäèí 0,040 ìêã,

N,N-äèìåòèëàíèëèí 0,050 ìêã,

N-ýòèëàíèëèí 0,045 ìêã,

N,N-äèýòèëàíèëèí 0,050 ìêã.

Îïðåäåëåíèþ íå ìåøàþò àöåòîí, àðîìàòè÷åñêèå óãëåâîäîðîäû è àëèôàòè÷å-

ñêèå ñïèðòû. Äëèòåëüíîñòü àíàëèçà, âêëþ÷àÿ ýêñòðàêöèþ ïðîáû, — 40 ìèí.

Ñðåäñòâà èçìåðåíèé, âñïîìîãàòåëüíûå óñòðîéñòâà, ðåàêòèâû

Ïðè âûïîëíåíèè ïðèìåíÿþò ñëåäóþùèå ñðåäñòâà èçìåðåíèé, âñïîìîãàòåëü-

íûå óñòðîéñòâà, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû. Äîïóñêàåòñÿ ïðèìåíåíèå äðóãèõ òèïîâ

ñðåäñòâ èçìåðåíèé, âñïîìîãàòåëüíîãî îáîðóäîâàíèÿ è õèìðåàêòèâîâ ñ àíàëîãè÷-

íûìè ìåòðîëîãè÷åñêèìè õàðàêòåðèñòèêàìè.

Ñðåäñòâà èçìåðåíèé

Õðîìàòîãðàô ãàçîâûé ñ ïëàìåííî-

èîíèçàöèîííûì äåòåêòîðîì

Âåñû ëàáîðàòîðíûå ÂËÐ-200 àíàëèòè÷åñêèå ÃÎÑÒ 24104-80Å

Ñåêóíäîìåð «Àãàò» ÃÎÑÒ 5072-79Å

Ìèêðîøïðèöû ÌØ-10 ÒÓ 5Å2.833.106

Ïîñóäà ëàáîðàòîðíàÿ ñòåêëÿííàÿ ÃÎÑÒ 1770-84

Êîëáû ìåðíûå, âìåñòèìîñòüþ 100, 1000 ñì

3

ÃÎÑÒ 1770-74Å

Ïèïåòêè, âìåñòèìîñòüþ 1, 5, 10 ñì

3

ÃÎÑÒ 20292-74

Âîðîíêà äåëèòåëüíàÿ ÃÎÑÒ 23932-79

Âñïîìîãàòåëüíûå óñòðîéñòâà

Õðîìàòîãðàôè÷åñêàÿ êîëîíêà ñòàëüíàÿ äëèíîé 3 ì è âíóòðåííèì äèàìåòðîì 3

ìì

Áèäèñòèëëÿòîð ÃÎÑÒ 15150-69

Ðåäóêòîð êèñëîðîäíûé ÒÓ 26-05-235-70

Ðîòàöèîííûé èñïàðèòåëü òèïà ÈÐ-1,

ÈÐ-1 Ì èëè àíàëîãè÷íûé

Öåíòðèôóãà ÑÌ-4, 3000 îá/ìèí

Ìàòåðèàëû

Ãåëèé â áàëëîíå ÒÓ 51-940-80

Âîäîðîä òåõíè÷åñêèé ÃÎÑÒ 3022-80

Âîçäóõ â áàëëîíå ÃÎÑÒ 11882-73

690 Ãëàâà IV. Áèîñðåä

Ðåàêòèâû

3% OV-1 íà õðîìàòîíå N-ñóïåð ôðàêöèè 0,16-0,20 ìì — íåïîäâèæíàÿ ôàçà äëÿ

çàïîëíåíèÿ õðîìàòîãðàôè÷åñêîé êîëîíêè

Àíèëèí ÷.ä.à. ÃÎÑÒ 5810-78

N-ìåòèëàíèëèí òåõíè÷åñêèé ÒÓ 6-02-571-81

N,N-äèìåòèëàíèëèí ÷.ä.à. ÃÎÑÒ 5855-78

Î-òîëóèäèí ÷.ä.à. ÃÎÑÒ 10205-73

N-ýòèëàíèëèí òåõíè÷åñêèé ÒÓ6214-12-37-77

N,N-äèýòèëàíèëèí ÷.ä.à. ÃÎÑÒ 10162-75

Äèôåíèë ÷.ä.à.

Âîäà äèñòèëëèðîâàííàÿ ÃÎÑÒ 6709-72

Õëîðèä íàòðèÿ õ.÷. ÃÎÑÒ 4233

Õëîðîôîðì ôàðì. ÃÎÑÒ 20015-88

Ïîäãîòîâêà ê âûïîëíåíèþ èçìåðåíèé

Ïåðåä âûïîëíåíèåì èçìåðåíèé ïðîâîäÿò ñëåäóþùèå ðàáîòû: ïîäãîòîâêà õðîìà-

òîãðàôè÷åñêîé êîëîíêè, ïðèãîòîâëåíèå ñòàíäàðòíûõ ñìåñåé, óñòàíîâëåíèå ãðàäó-

èðîâî÷íîé õàðàêòåðèñòèêè.

Ïðèãîòîâëåíèå ñòàíäàðòíûõ ñìåñåé

Äëÿ ïîñòðîåíèÿ ãðàäóèðîâî÷íîãî ãðàôèêà ñîáèðàþò ìî÷ó, íå ñîäåðæàùóþ èññëå-

äóåìûõ êîìïîíåíòîâ, è ãîòîâÿò ñåðèþ ðàáî÷èõ ñòàíäàðòíûõ ðàñòâîðîâ.

Ñòàíäàðòíûå ðàñòâîðû àìèíîñîåäèíåíèé è âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà ãîòîâÿò â

ìåðíûõ êîëáàõ âìåñòèìîñòüþ 100 ñì

3

ñ ñîäåðæàíèåì ýòèõ âåùåñòâ 20, 30, 50, 60,

70 ìã è äèôåíèëà ñ ñîäåðæàíèåì 100, 90, 70, 60, 50 ìã â õëîðîôîðìå.

Ïîäãîòîâêà õðîìàòîãðàôè÷åñêîé êîëîíêè

Õðîìàòîãðàôè÷åñêóþ êîëîíêó ïåðåä çàïîëíåíèåì íåïîäâèæíîé ôàçîé ïðîìû-

âàþò äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé, àöåòîíîì, ãåêñàíîì, âûñóøèâàþò â òîêå èíåð-

òíîãî ãàçà. Çàïîëíåíèå õðîìàòîãðàôè÷åñêîé êîëîíêè íàñàäêîé ïðîâîäÿò ïîä

âàêóóìîì. Êîíöû êîëîíêè çàêðûâàþò ñòåêëîâàòîé è, íå ïîäêëþ÷àÿ ê äåòåêòîðó,

êîíäèöèîíèðóþò â òîêå ãàçà-íîñèòåëÿ (ãåëèÿ) ñ ðàñõîäîì 55 ñì

3

/ìèí ïðè òåìïå-

ðàòóðå 300°Ñ â òå÷åíèå 18 ÷. Ïîñëå îõëàæäåíèÿ êîëîíêó ïîäêëþ÷àþò ê äåòåêòîðó,

çàïèñûâàþò íóëåâóþ ëèíèþ â ðàáî÷åì ðåæèìå. Ïðè îòñóòñòâèè ìåøàþùèõ âëèÿ-

íèé êîëîíêà ãîòîâà ê ðàáîòå.

Óñòàíîâëåíèå ãðàäóèðîâî÷íîé õàðàêòåðèñòèêè

Ãðàäóèðîâî÷íóþ õàðàêòåðèñòèêó óñòàíàâëèâàþò ìåòîäîì âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà (â

êà÷åñòâå âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà — äèôåíèë). Îíà âûðàæàåò çàâèñèìîñòü êàëèáðîâî÷-

íûõ êîýôôèöèåíòîâ (Ki/ñò) îò îòíîøåíèÿ ïëîùàäåé ïèêîâ íà õðîìàòîãðàììå (Si/

Sñò) è ñòðîèòñÿ ïî 5 ñåðèÿì ñòàíäàðòíûõ ðàñòâîðîâ äëÿ ãðàäóèðîâêè. Äëÿ ýòîãî â êàæ-

äóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì

3

âíîñÿò íåáîëüøîå êîëè÷åñòâî õëîðîôîðìà è âçâå-

øèâàþò, çàòåì ïðèáàâëÿþò àìèíîñîåäèíåíèÿ è âíóòðåííèé ñòàíäàðò è âçâåøèâàþò

êîëáó ïîâòîðíî. Îáúåì äîâîäÿò äî ìåòêè õëîðîôîðìîì è ïî ðàçíîñòè ðåçóëüòàòîâ

ïåðâîãî è âòîðîãî âçâåøèâàíèé âû÷èñëÿþò ìàññó àìèíîñîåäèíåíèé è âíóòðåííåãî

Ñòàíäàðòíûå ìåòîäèêè 691

ñòàíäàðòà. Ñðîê õðàíåíèÿ — 3 ÷.

Òàáëèöà IV.12. Ñòàíäàðòíûå ðàñòâîðû äëÿ óñòàíîâëåíèÿ ãðàäóèðîâî÷íîé õàðàêòåðèñòèêè ïðè îïðåäå-

ëåíèè êîíöåíòðàöèè àìèíîñîåäèíåíèé (ôðàãìåíò øêàëû)

Íîìåð ñìåñè äëÿ ãðàäóèðîâêè 1 2 3 4 5

Ìàññà ÀÍÈËÈÍÀ

â 10 ìì

3

õëîðîôîðìà, ìêã 2,0 3,0 5,0 6,0 7,0

Ìàññà N-ÌÅÒÈËÀÍÈËÈÍÀ

â 10 ìì

3

õëîðîôîðìà, ìêã 2,0 3,0 5,0 6,0 7,0

Ìàññà Î-ÒÎËÓÈÄÈÍÀ

â 10 ìì

3

õëîðîôîðìà, ìêã 2,0 3,0 5,0 6,0 7,0

Ìàññà N,N-ÄÈÌÅÒÈËÀÍÈËÈÍÀ

â 10 ìì

3

õëîðîôîðìà, ìêã 2,0 3,0 5,0 6,0 7,0

Ìàññà N-ÝÒÈËÀÍÈËÈÍÀ 2,0 3,0 5,0 6,0 7,0

â 10 ìì

3

õëîðîôîðìà, ìêã

Ìàññà N,N-ÄÈÝÒÈËÀÍÈËÈÍÀ

â 10 ìì

3

õëîðîôîðìà, ìêã 2,0 3,0 5,0 6,0 7,0

Ìàññà ÄÈÔÅÍÈËÀ

â 10 ìì

3

õëîðîôîðìà, ìêã 10,0 9,0 7,0 6,0 5,0

Â õðîìàòîãðàôè÷åñêóþ êîëîíêó ÷åðåç èñïàðèòåëü ââîäÿò ïî 10 ìì

3

êàæäîãî

ñòàíäàðòíîãî ðàñòâîðà è àíàëèçèðóþò â óñëîâèÿõ:

òåìïåðàòóðà òåðìîñòàòà êîëîíîê 110°Ñ,

òåìïåðàòóðà èñïàðèòåëÿ 180°Ñ,

òåìïåðàòóðà äåòåêòîðà 120°Ñ,

ñêîðîñòü ïðîãðàììèðîâàíèÿ òåìïåðàòóðû 3°Ñ/ìèí,

ðàñõîä ãàçà-íîñèòåëÿ (ãåëèÿ) 55 ñì

3

/ìèí,

ðàñõîä âîäîðîäà 33 ñì

3

/ìèí,

ðàñõîä âîçäóõà 300 ñì

3

/ìèí,

øêàëà èçìåðèòåëÿ òîêà 10 × 10

–12

À,

ñêîðîñòü äèàãðàììíîé ëåíòû 240 ìì/÷,

âðåìÿ óäåðæèâàíèÿ: õëîðîôîðìà 1 ìèí 45 ñ,

àíèëèíà 6 ìèí 15 ñ,

N-ìåòèëàíèëèíà 9 ìèí,

î-òîëóèäèíà 9 ìèí 15 ñ,

N,N-äèìåòèëàíèëèíà 9 ìèí 50 ñ,

N-ýòèëàíèëèíà 11 ìèí,

N,N-äèýòèëàíèëèíà 20 ìèí,

äèôåíèëà 37 ìèí.

Íà õðîìàòîãðàììå íàõîäÿò çíà÷åíèå ïëîùàäåé ïèêîâ è âíóòðåííåãî ñòàíäàð-

òà è âû÷èñëÿþò êàëèáðîâî÷íûå êîýôôèöèåíòû íà îñíîâàíèè àíàëèçà áèíàðíûõ

ñìåñåé: àíèëèí-äèôåíèë, N-ìåòèëàíèëèí-äèôåíèë, î-òîëóèäèí-äèôåíèë, N,N-

äèìåòèëàíèëèí-äèôåíèë, N-ýòèëàíèëèí-äèôåíèë è N,N-äèýòèëàíèëèí-äèôå-

íèë. Çíà÷åíèå êàëèáðîâî÷íîãî êîýôôèöèåíòà âû÷èñëÿþò ïî ôîðìóëå:

Scm . Qi

692 Ãëàâà IV. Áèîñðåä

Ki/cm = ————————,

Si . Qcm

ãäå Si, Scm — ïëîùàäè ïèêîâ èññëåäóåìîãî êîìïîíåíòà è ñòàíäàðòà, ìì

2

; Qi,

Qcm — êîëè÷åñòâî èññëåäóåìîãî êîìïîíåíòà è ñòàíäàðòà, ìã.

Ïî ðåçóëüòàòàì 5 èçìåðåíèé îïðåäåëÿåòñÿ ñðåäíåå çíà÷åíèå êàëèáðîâî÷íîãî

êîýôôèöèåíòà Ki/cm è ñòðîèòñÿ ãðàäóèðîâî÷íûé ãðàôèê â êîîðäèíàòàõ êàëèáðî-

âî÷íûé êîýôôèöèåíò — îòíîøåíèå ïëîùàäåé ïèêîâ Si/Scm.

Ãðàäóèðîâêó ïðîâåðÿþò 1 ðàç â íåäåëþ è ïðè ñìåíå ïàðòèè ðåàêòèâîâ.

Îòáîð ïðîá

Îòáîð ïðîá ìî÷è â îáúåìå 100 ñì

3

ïðîèçâîäèòñÿ â òùàòåëüíî âûìûòûé ñòåêëÿí-

íûé ñîñóä ñ ïðèòåðòîé ïðîáêîé. Àíàëèç ìî÷è ïðîâîäèòü ñðàçó èëè õðàíèòü â õîëî-

äèëüíèêå íå áîëåå 12 ÷ ïîñëå îòáîðà ïðîáû.

Âûïîëíåíèå èçìåðåíèé

Àíàëèçèðóåìóþ ïðîáó ìî÷è â êîëè÷åñòâå 100 ñì

3

ïîìåùàþò â äåëèòåëüíóþ âîðîí-

êó, äîáàâëÿþò 30 ã (õëîðèä íàòðèÿ) è 10 ñì

3

õëîðôîðìà. Ñîäåðæèìîå âîðîíêè

èíòåíñèâíî âñòðÿõèâàþò 15 ìèí, ïîñëå îòñòàèâàíèÿ õëîðîôîðìåííûé ýêñòðàêò

ñëèâàþò â ïðîáèðêó è öåíòðèôóãèðóþò äëÿ äåíàòóðàöèè áåëêà 20 ìèí. Ïîëó÷åí-

íûé öåíòðèôóãàò óïàðèâàþò íà ðîòàöèîííîì èñïàðèòåëå è ïðîâîäÿò ãàçîõðîìà-

òîãðàôè÷åñêèé àíàëèç.

Âû÷èñëåíèå ðåçóëüòàòîâ èçìåðåíèé

Ðàñ÷åò êîíöåíòðàöèè àíèëèíà, N-ìåòèëàíèëèíà, î-òîëóèäèíà, N,N-äèìåòèëàíè-

ëèíà, N-ýòèëàíèëèíà, N,N-äèýòèëàíèëèíà (ìêã/ñì

3

) â áèîïðîáå âû÷èñëÿþò ïî

ôîðìóëå:

Si . m

cm

. Ki/cm . 1000

C = —————————————,

Scm . V

ãäå C — êîíöåíòðàöèÿ àíàëèçèðóåìûõ ñîåäèíåíèé â áèîïðîáå, ìêã/ñì

3

; Si, Scm

— ïëîùàäè ïèêîâ êîìïîíåíòîâ è ñòàíäàðòà, ìì

2

; Ki/cm — êàëèáðîâî÷íûé êîýô-

ôèöèåíò; m

cm

— íàâåñêà ñòàíäàðòà, ìã; V — îáúåì ïðîáû, ñì

3

.

Ìåòîäè÷åñêèå óêàçàíèÿ ïî îïðåäåëåíèþ êîíöåíòðàöèé õèìè÷åñêèõ âåùåñòâ

â áèîñðåäàõ ïðåäíàçíà÷åíû äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ â ñèñòåìå Ãîññàíýïèäíàäçîðà Ðîñ-

ñèè, â ëå÷åáíûõ è íàó÷íûõ ó÷ðåæäåíèÿõ, ðàáîòàþùèõ â îáëàñòè ïðîôïàòîëîãèè

è ýêîëîãèè ÷åëîâåêà è íàó÷íî-èññëåäîâàòåëüñêèõ èíñòèòóòàõ, çàíèìàþùèõñÿ

âîïðîñàìè ãèãèåíû îêðóæàþùåé ñðåäû [42].

Èñ÷åðïûâàþùèå ñâåäåíèÿ î äîïóñòèìûõ óðîâíÿõ ñîäåðæàíèÿ âðåäíûõ

âåùåñòâ (ïðîìûøëåííûõ ÿäîâ) â ðàçëè÷íûõ áèîñðåäàõ (êðîâü, ìî÷à, ñûâîðîòêà

è ïëàçìà êðîâè, ëèìôîöèòû è ýðèòðîöèòû, æèðîâûå òêàíè, âûäûõàåìûé âîçäóõ)

ñîáðàíû â ôóíäàìåíòàëüíîì ñïðàâî÷íèêå [138].

Ñòàíäàðòíûå ìåòîäèêè 693

Другов Ю.С., Родин А.А. Пробоподготовка в экологическом анализе

Подождите немного. Документ загружается.